"SUP-B15 Cells(贈送Str鑒定報告)|人Ph+急淋白血病細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：懸浮

Walker-Ca.256細胞類似產品：：Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞

H-510A細胞類似產品：：HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞

LN-18細胞類似產品：：SLK細胞、RH30SJ細胞、WM 266-4細胞

SGC7901/DDP細胞類似產品：：MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞

KM12細胞類似產品：：Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞

SUP-B15 Cells(贈送Str鑒定報告)|人Ph+急淋白血病細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

細胞傳代方法：１：２傳代。３天內可長滿。

NCI-H28細胞類似產品：：Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞

SUM102細胞類似產品：：CPAE細胞、GS9L細胞、H2.35細胞

MC3T3-E1 Subclone 24細胞類似產品：：H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞

H-2108細胞類似產品：：HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞

HT-115細胞類似產品：：32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮生長

OVCAR 5細胞類似產品：：Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞

NCI-H1770細胞類似產品：：SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞

Hs832.Tc細胞類似產品：：Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞

22Rv-1細胞類似產品：：SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞

CL40細胞類似產品：：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞

SW 1417細胞類似產品：：OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞

細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提GAO血清濃度(ZuiGAO不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性Zui強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不HAO的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！

H647細胞類似產品：：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞

NCI H548細胞類似產品：：HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞

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SNU449細胞類似產品：：BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞

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HCC1806細胞類似產品：：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞

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CAL 33細胞類似產品：：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞

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SNU407細胞類似產品：：NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞

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FL62891細胞類似產品：：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞

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Pt K2細胞類似產品：：Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞

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ZR75-30細胞類似產品：：NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞

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H-9細胞類似產品：：NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞

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Bovine Turbinate細胞類似產品：：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞

SP2-0-Ag14細胞類似產品：：KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞

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H-1404細胞類似產品：：RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞

Hs 683細胞類似產品：：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞

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Jiyoye細胞類似產品：：ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞

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NBL-S細胞類似產品：：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞

SUDHL6細胞類似產品：：H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞

BRL3A細胞類似產品：：WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞

Mc Ardle 7777細胞類似產品：：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞

NCI-H1436細胞類似產品：：LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞

CTSC-3細胞類似產品：：HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞

Alpha Mouse Liver 12細胞類似產品：：KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞

NPC-TW 039細胞類似產品：：Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞

B16BL-6細胞類似產品：：MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞

FTC133細胞類似產品：：HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞

HEK 293 EBNA細胞類似產品：：Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞

BCAP37細胞類似產品：：HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞

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C57 Mouse Tumor 64細胞類似產品：：BALB/3T3細胞、MDAPCa2b細胞、RT-4細胞

NCI-H3255細胞類似產品：：CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞

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NCI H2106細胞類似產品：：IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞

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VMRCRCZ細胞類似產品：：BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞

NCI-H1882細胞類似產品：：HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞

L-540細胞類似產品：：FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞

SU.86.86細胞類似產品：：D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞

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PL-5細胞類似產品：：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞

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Hela-Ap-1細胞類似產品：：LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞

JKT-1細胞類似產品：：HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞

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T1-73細胞類似產品：：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞

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