"SW527 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺癌細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因導致，我們該怎么進行解決？以下是國內外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

HuT-102細胞類似產品：：102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞

COLO 684細胞類似產品：：NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞

3T6 Swiss Albino細胞類似產品：：D283-MED細胞、NCI H23細胞、TI-73細胞

WM-451Lu細胞類似產品：：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞

CTLL2細胞類似產品：：HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞

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細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步沒有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

INS1E細胞類似產品：：HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞

COLO 320 DM細胞類似產品：：HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞

COR-L23/P細胞類似產品：：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞

LAN1細胞類似產品：：HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞

Dakiki細胞類似產品：：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

SW527 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺癌細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

EBTr (NBL-4)細胞類似產品：：Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞

T98G細胞類似產品：：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞

L 363細胞類似產品：：WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞

NCI-H295R細胞類似產品：：OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞

P3/NS-1細胞類似產品：：3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞

KP2細胞類似產品：：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞

如何進行細胞復蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】１)從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但ZuiHAO為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天ZuiHAO換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做HAO防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復蘇ZuiHAO用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉移到裝有３７度預熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。

細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更HAO。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣GAO壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記HAO細胞名稱和凍存日期，同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝HAO細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，Zui后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。

HEK 293細胞類似產品：：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞

End1/E6E7細胞類似產品：：Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞

NCI-128細胞類似產品：：SL1細胞、SW 48細胞、NCIH1651細胞

SKCO1細胞類似產品：：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞

EU-2細胞類似產品：：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞

Li-7細胞類似產品：：NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞

Caco-2/ATCC細胞類似產品：：NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞

Panc-08.13細胞類似產品：：C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞

QGY7701細胞類似產品：：U343細胞、CX1細胞、AM細胞

H2172細胞類似產品：：alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞

H4-II-EC3細胞類似產品：：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞

Simpson細胞類似產品：：RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞

NCI-H747細胞類似產品：：C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞

Hep G2/C3A細胞類似產品：：HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞

PC-3M-1E8細胞類似產品：：OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞

MC/CAR細胞類似產品：：A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞

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SK-N-BE(2C)細胞類似產品：：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞

HCC1569細胞類似產品：：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞

B16/F1細胞類似產品：：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞

SNU601細胞類似產品：：KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞

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Jurkat-E6細胞類似產品：：Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞

Mono-Mac-6細胞類似產品：：KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞

KE37細胞類似產品：：H2107細胞、J111細胞、M14細胞

SW527 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺癌細胞

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NCI-H1666細胞類似產品：：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞

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DMS273細胞類似產品：：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞

H510A細胞類似產品：：DHL-5細胞、PLB 985細胞、COLO-741細胞

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MADB106細胞類似產品：：JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞

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OAW-42細胞類似產品：：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞

NIH-3T3-L1細胞類似產品：：Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞

HuH6細胞類似產品：：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞

SK-ChA-1細胞類似產品：：CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞

SK-RC-39細胞類似產品：：PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞

Roswell Park Memorial Institute 8402細胞類似產品：：Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞

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RPMI no. 8226細胞類似產品：：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞

KASUMI6細胞類似產品：：NCIH1435細胞、OCI/AML-3細胞、RMG1細胞

NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞類似產品：：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞

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TCCPAN2細胞類似產品：：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞

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TO175T細胞類似產品：：CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞

H-1385細胞類似產品：：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞

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K562細胞類似產品：：SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞

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38C-13細胞類似產品：：MAVER細胞、HT-3細胞、U343細胞

NCI-H1869細胞類似產品：：LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞

Hs739T細胞類似產品：：OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞

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HCC0095細胞類似產品：：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞

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H-1581細胞類似產品：：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞

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B4G12細胞類似產品：：MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞

H9細胞類似產品：：8402細胞、TE-10細胞、HEK 293細胞

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CA922細胞類似產品：：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞

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