"L-M(TK-) Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠結締組織細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體：黑色的，HAO象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中Zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，GAO倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良HAO，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提GAO細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。

細胞生長：貼壁

WEHI 164 TC細胞類似產品：：Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞

ANA-1細胞類似產品：：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞

MUM2B細胞類似產品：：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞

SV40-MES13細胞類似產品：：KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞

RPMI7666細胞類似產品：：MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞

L-M(TK-) Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠結締組織細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

預防細胞污染的注意事項：實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內；實驗用品用完應移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水（應每周更換），待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

P3X63 Ag8.653細胞類似產品：：Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞

COLO-320HSR細胞類似產品：：UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞

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SJSA1細胞類似產品：：L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞

GM02131A細胞類似產品：：B16/F10細胞、PLC-8024細胞、MDA MB 453細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

L-M(TK-) Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠結締組織細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

OV2008細胞類似產品：：NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞

Det. 562細胞類似產品：：H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞

CG-4細胞類似產品：：Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞

NCIH1568細胞類似產品：：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞

3T3-L1細胞類似產品：：NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞

KTC1細胞類似產品：：VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞

細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記HAO細胞名稱和凍存日期，同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝HAO細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，ZuiHAO取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。

正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存HAO了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇Zui合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記HAO細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以Zui快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟ZuiHAO使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做HAO記錄是非常非常重要的！還有一個Zui重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做HAO防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。

CEM T4細胞類似產品：：DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞

HNE-1細胞類似產品：：SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞

L-cells細胞類似產品：：UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞

Hepa-RG細胞類似產品：：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞

NBLAN5T細胞類似產品：：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞

PG-4 (S+L-)細胞類似產品：：SB細胞、MCF7細胞、COC1/CDDP細胞

RASMCs細胞類似產品：：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞

Super Tube細胞類似產品：：SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞

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RL-95-2細胞類似產品：：SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞

HRC-99細胞類似產品：：CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞

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H711細胞類似產品：：IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞

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HCe-8693細胞類似產品：：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞

HPAF-2細胞類似產品：：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞

H1781細胞類似產品：：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞

MPVECs細胞類似產品：：WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞

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NCI-H1395細胞類似產品：：NCI-HUT-520細胞、MESSA細胞、H-748細胞

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SNG-M細胞類似產品：：SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞

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Murine Lung Epithelial-12細胞類似產品：：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞

H82細胞類似產品：：FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞

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FT-293細胞類似產品：：B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞

DMS-53細胞類似產品：：HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞

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PLA801C細胞類似產品：：MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞

FLC7細胞類似產品：：GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞

A9 (Hamprecht)細胞類似產品：：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞

HFLS-OA細胞類似產品：：HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞

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