"JHH-2 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肝癌細胞

細胞背景資料：肝癌；腹水轉移；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體：黑色的，HAO象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中Zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，GAO倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良HAO，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提GAO細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。

細胞生長：貼壁

K562/ADR細胞類似產品：：LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞

HEB細胞類似產品：：KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞

A 72細胞類似產品：：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞

C32r細胞類似產品：：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞類似產品：：EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞

JHH-2 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肝癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

GM05384細胞類似產品：：RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞

UM-UC14細胞類似產品：：NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞

MKN 45細胞類似產品：：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞

MUTZ3細胞類似產品：：Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞

SNU869細胞類似產品：：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

JHH-2 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肝癌細胞

細胞生長特性：貼壁

NCIH64細胞類似產品：：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞

C3H10T1/2CL8細胞類似產品：：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞

MDA-MB 468細胞類似產品：：U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞

NCIH1437細胞類似產品：：H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞

NCI-H2135細胞類似產品：：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞

NCI-H1385細胞類似產品：：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞

細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇HAO的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化，因而細胞失去原有的遺傳性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前，細胞凍存Zui常用的技術是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增GAO，pH值改變，部分蛋白質由于上述原因而變性，引起細胞內部空間結構紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內結構成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分，減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提GAO細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外，減少胞內形成冰結晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。

Hs 729細胞類似產品：：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞

A172細胞類似產品：：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞

IOSE 80細胞類似產品：：H2330細胞、NALM-6細胞、FHC細胞

KG-1a細胞類似產品：：HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞

HCC0366細胞類似產品：：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞

H2066細胞類似產品：：H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞

293/EBNA-1細胞類似產品：：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞

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NCI-SNU-886細胞類似產品：：SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞

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LA-N-6(OAN)細胞類似產品：：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞

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JHH-2 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肝癌細胞

BE(2)-C細胞類似產品：：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞

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H1666_DA細胞類似產品：：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞

MLE-12細胞類似產品：：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞

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HSC4細胞類似產品：：H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞

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HCoEpiC細胞類似產品：：P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞

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UWB1-289細胞類似產品：：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞

GM637A細胞類似產品：：HO-8910 PM細胞、686LN-M4e細胞、Hs 746.T細胞

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NIE-115細胞類似產品：：MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞

Hs-729-T細胞類似產品：：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞

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ROS 17/28細胞類似產品：：A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞

TMK-1細胞類似產品：：MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞

HGF-1細胞類似產品：：PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞

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3T3-A31細胞類似產品：：RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞

Mel RM細胞類似產品：：MFC細胞、HEK-293-F細胞、H2135細胞

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DMS 114細胞類似產品：：MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞

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MOVAS細胞類似產品：：SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞

JHH-2 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肝癌細胞

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