"COLO 16 Cells(贈送Str鑒定報告)|人皮膚鱗癌細胞
細胞背景資料:皮膚鱗癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液;2)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后,應立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內加入Hanks液少量,輕輕轉動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內培養(yǎng)液,按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導致細胞脫落、損傷;2)掌握HAO消化濃度,當消化液濃度過GAO時,消化時間應縮短,過低時細胞消化時間相對延長。
細胞生長:貼壁
H2052_MM細胞類似產品::SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
Reuber-H-35 hepatoma細胞類似產品::HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞
HIT細胞類似產品::SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
P3-X63-Ag 8.653細胞類似產品::NCIH1618細胞、NBLS細胞、TGW細胞
NCIH841細胞類似產品::C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
COLO 16 Cells(贈送Str鑒定報告)|人皮膚鱗癌細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,ZuiHAO經過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內無CO2;2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
P3X63NS1細胞類似產品::KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
SP-2細胞類似產品::FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
HFLS-OA細胞類似產品::HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
T98-G細胞類似產品::H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
HSC6細胞類似產品::HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁
RC-4B細胞類似產品::RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
UMUC3細胞類似產品::JJN3細胞、hTERT-RPE1細胞、Rat Lung-65細胞
SW480細胞類似產品::HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細胞類似產品::Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞
hTERT-HME-1細胞類似產品::293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞
Ramos G6.C10細胞類似產品::SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記HAO細胞名稱和凍存日期,同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝HAO細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,ZuiHAO取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存Zui常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增GAO,pH值改變,部分蛋白質由于上述原因而變性,引起細胞內部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分,減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提GAO細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外,減少胞內形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
3T3細胞類似產品::Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
H1436細胞類似產品::Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
16HBE細胞類似產品::MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
CCRF細胞類似產品::EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞
Human Embryo Lung-1細胞類似產品::H-1437細胞、SKNBE(1)細胞、TKB-1細胞
CLL-CII細胞類似產品::SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
Caco-2/BBe 1細胞類似產品::SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
G-292, clone A141B1細胞類似產品::Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞
H1522細胞類似產品::Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
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CWR22R-V1細胞類似產品::HLE-SRA-01/04細胞、NG-108-15細胞、CAL12T細胞
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PFSK1細胞類似產品::DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
WM 266-4細胞類似產品::CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞
COLO-741細胞類似產品::HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞
LIPF155C細胞類似產品::DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
H-1819細胞類似產品::5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
H2122細胞類似產品::HTR-8/SV-neo細胞、H2023細胞、RMa-bm細胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞類似產品::NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞
CMT64細胞類似產品::LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
GM04680細胞類似產品::PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
NCIH2073細胞類似產品::BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
EBC1細胞類似產品::Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
Tu686細胞類似產品::UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞
Jiyoye (P-2003)細胞類似產品::H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞
T24(ECV304)細胞類似產品::Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
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GM00346B細胞類似產品::ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
K7M2-WT細胞類似產品::SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
Karpas-299細胞類似產品::HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
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GM03570細胞類似產品::Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞
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Nb2細胞類似產品::C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
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MBdSMC細胞類似產品::NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
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U138細胞類似產品::EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
RAMSCs細胞類似產品::H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
SNB19細胞類似產品::TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞
SNB19細胞類似產品::TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞
TSCC1細胞類似產品::SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞
Panc08.13細胞類似產品::PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
NCI-SNU-407細胞類似產品::CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞
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Jurkat clone A3細胞類似產品::LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
DoTc2-4510細胞類似產品::MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
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HET1A細胞類似產品::COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
CNE1-LUC細胞類似產品::TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
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IB-RS-2細胞類似產品::CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞
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Hs888Lu細胞類似產品::COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞
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BN-CL2細胞類似產品::SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
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COLO-680N細胞類似產品::HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
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GM03570E細胞類似產品::SU-DHL-2細胞、SP-2/0-AG14細胞、SV40 MES 13細胞
C3A細胞類似產品::QGP 1細胞、ROS17/28細胞、MES-23.5細胞
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BC-028細胞類似產品::FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
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DKMG細胞類似產品::NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
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RPMI-8226S細胞類似產品::RCSMC細胞、C32 mel細胞、HT115細胞
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上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。