"LK2 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肺鱗癌細胞

細胞背景資料：肺鱗癌；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數量小，細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。

細胞生長：貼壁

MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞類似產品：：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞

KE-37細胞類似產品：：KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞

PL-45細胞類似產品：：KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞

M-1細胞類似產品：：HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞

SU-DHL-6細胞類似產品：：SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞

LK2 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肺鱗癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

預防細胞污染的注意事項：實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內；實驗用品用完應移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水（應每周更換），待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

NCI-H1930細胞類似產品：：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞

SHP77細胞類似產品：：HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞

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EFO-27細胞類似產品：：PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞

RT-112細胞類似產品：：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

LK2 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肺鱗癌細胞

細胞生長特性：貼壁

KCL-22細胞類似產品：：Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞

SUSM1細胞類似產品：：SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞

RCS細胞類似產品：：A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞

ROS17/2.8細胞類似產品：：WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞

K1735細胞類似產品：：C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞

Michigan Cancer Foundation-12F細胞類似產品：：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞

常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或GAO過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過GAO則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸的過程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經解凍后，為何會發(fā)生細胞數目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。

貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性Zui強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不HAO的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！

IHH-4細胞類似產品：：PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞

EO771細胞類似產品：：NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞

RPMI-2650細胞類似產品：：BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞

HEK-293-H細胞類似產品：：LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞

MDA-157細胞類似產品：：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞

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Panc327細胞類似產品：：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞

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RGC5細胞類似產品：：HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞

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LK2 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肺鱗癌細胞

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VM-CUB-I細胞類似產品：：SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞

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HDLM-2細胞類似產品：：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞

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Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞類似產品：：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞

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KU-19-19細胞類似產品：：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞

SK-N-BE(1)n細胞類似產品：：NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞

SK-NEP-1細胞類似產品：：SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞

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SHG 44細胞類似產品：：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞

JURKAT E-6.1細胞類似產品：：MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞

L- cell細胞類似產品：：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞

NCI H23細胞類似產品：：H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞

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130T細胞類似產品：：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞

Keio University-19-19細胞類似產品：：SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞

PL11細胞類似產品：：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞

CHL-CL-11細胞類似產品：：AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞

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MOLP8細胞類似產品：：D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞

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DK-MG細胞類似產品：：CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞

MM96L細胞類似產品：：SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞

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COR-L105細胞類似產品：：HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞

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LS 513細胞類似產品：：H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞

LA-N-1細胞類似產品：：HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞

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H1792細胞類似產品：：IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞

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