"UMC-11 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肺良性腫瘤細胞
細胞背景資料:肺腫瘤;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在GAO壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現象!可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉GAO鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞生長:貼壁
NCI-H187細胞類似產品::RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞
UCLA-SO-14細胞類似產品::NCI-H650細胞、HDSMC細胞、H-711細胞
H82細胞類似產品::FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
Reuber-H-35 hepatoma細胞類似產品::HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞
CCRF/CEM-C7細胞類似產品::SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
UMC-11 Cells(贈送Str鑒定報告)|人肺良性腫瘤細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)時分布不均勻,通常操作步驟:做細胞生物學實驗,細胞鋪板大概是我們Zui常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點經驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細胞懸液,沿孔壁(稍離開一點孔底即可,不要離底太GAO)直接接入,移液器不需完全打到Zui大,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數太多會導致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(逆時針效果不HAO),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔依此類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細胞懸液會平鋪在整個孔底,注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板HAO掌握,效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細胞以后(比如傳代HAO/分HAO細胞以后),先順時針搖晃3次,馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
MDA-MB-134-VI細胞類似產品::MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
C8-D1A細胞類似產品::MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞
DMS 53細胞類似產品::CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
HPAF-2細胞類似產品::L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
NCI-H460細胞類似產品::SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁
SNU-1細胞類似產品::MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞類似產品::LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞
KYSE-180細胞類似產品::SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
Hs 636.T細胞類似產品::EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
H-1703細胞類似產品::Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
Hs 606.T細胞類似產品::NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的完全培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間Zui長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請YOU先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做HAO照片記錄并聯系實驗室。
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較GAO的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不HAO,有證據嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很HAO并且不損失細胞!
Mono-Mac-1細胞類似產品::ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
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DMS114細胞類似產品::LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
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KYSE510細胞類似產品::Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
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SW 962細胞類似產品::OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞
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FC33細胞類似產品::MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞
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ZR751細胞類似產品::PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
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Rainbow Trout Embryo細胞類似產品::SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
786-0WT細胞類似產品::PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞
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HBZY 1細胞類似產品::HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
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Panc 5.04細胞類似產品::WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞
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上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。