"A-72 Cells(贈送Str鑒定報告)|犬癌細胞

細胞背景資料：癌細胞；金毛獵犬

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

接收細胞相關問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。

細胞生長：貼壁

HF-91細胞類似產品：：TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞

JEKO細胞類似產品：：H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞

LUDLU 1細胞類似產品：：HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞

Mino細胞類似產品：：EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞

KYSE-520細胞類似產品：：Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞

A-72 Cells(贈送Str鑒定報告)|犬癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

P3-X63-Ag8.653細胞類似產品：：IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞

SF126細胞類似產品：：KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞

SUM-149PT細胞類似產品：：AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞

Hepa 1-6細胞類似產品：：H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞

KRC-Y細胞類似產品：：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

A-72 Cells(贈送Str鑒定報告)|犬癌細胞

細胞生長特性：貼壁

PA I細胞類似產品：：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞

CCD1112Sk細胞類似產品：：NB1RGB細胞、BL6細胞、MV-4:11細胞

SKO-007細胞類似產品：：HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞

NIH-OVCAR-3細胞類似產品：：251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞

OCI-Ly 7細胞類似產品：：H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞

C-32細胞類似產品：：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞

細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提GAO血清濃度(ZuiGAO不能超過２０%)，或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性Zui強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不HAO的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！

Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞類似產品：：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞

184A1細胞類似產品：：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞

H-2135細胞類似產品：：ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞

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Fetal Rhesus Kidney-4細胞類似產品：：IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞

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PC3M-2B4細胞類似產品：：COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞

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MDA-MB-231-luc細胞類似產品：：211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞

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TH1細胞類似產品：：A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞

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Sarcoma OSteogenic-2細胞類似產品：：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞

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REC 1細胞類似產品：：HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞

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Leydig細胞類似產品：：CTSC-3細胞、BPH-1細胞、MC3T3-L1細胞

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C33-A細胞類似產品：：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞

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NB4細胞類似產品：：Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞

Neuro-2a細胞類似產品：：HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞

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