"SACC-83 Cells(贈送Str鑒定報告)|涎腺腺樣囊性癌細胞

細胞背景資料：涎腺腺樣囊性癌

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或對數生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經８０～１００目篩網過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數并調整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，Zui后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

細胞生長：貼壁

SY5Y細胞類似產品：：DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞

SK.OV.3細胞類似產品：：HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞

HCT-8細胞類似產品：：NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞

H2452細胞類似產品：：BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞

MASMC細胞類似產品：：MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞

SACC-83 Cells(贈送Str鑒定報告)|涎腺腺樣囊性癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

HUV-EC-C細胞類似產品：：B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞

WRL68細胞類似產品：：D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞

Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞類似產品：：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞

PBL細胞類似產品：：H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞

HSF細胞類似產品：：C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

CORL88細胞類似產品：：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞

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Hs840T細胞類似產品：：BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的完全培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間Zui長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請YOU先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做HAO照片記錄并聯(lián)系實驗室。

正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存HAO了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數活細胞數，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據細胞類型選擇Zui合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記HAO細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數量和位置。以Zui快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟ZuiHAO使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做HAO記錄是非常非常重要的！還有一個Zui重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做HAO防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。

H1522細胞類似產品：：Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞

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SACC-83 Cells(贈送Str鑒定報告)|涎腺腺樣囊性癌細胞

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