"GC-1 spg Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠精原細胞
細胞背景資料:精原細胞;SV40轉化;BALB/c
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞接收操作說明:請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用,懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多,當然,有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞,但是,長期經驗來說,貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計是細胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導致(Zui主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生),個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝HAO備用,如細胞密度GAO于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實驗室沒有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話,ZuiHAO不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的,不然會長得很慢,嚴重的,會導致細胞死亡等危險),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細胞后,直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
細胞生長:貼壁
Michigan Cancer Foundation-12A細胞類似產品::NBL-12細胞、HSC/mHSC細胞、CAL27細胞
4T1-LUC細胞類似產品::HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
GMK,BSC-1細胞類似產品::TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞
SUM-52-PE細胞類似產品::MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞
639V細胞類似產品::Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞
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細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
LL/2(LLc1)細胞類似產品::CHL/IU細胞、MDA-MB-361細胞、SW 1463細胞
NCI-H522細胞類似產品::SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
HEK 293細胞類似產品::WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
22Rv-1細胞類似產品::SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
ECC-1細胞類似產品::3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁
293-H細胞類似產品::NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞類似產品::IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
NCIH810細胞類似產品::NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
MES-23.5細胞類似產品::P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
COLO 684細胞類似產品::NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞
FK81細胞類似產品::TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞
培養(yǎng)細胞真的不難,Zui關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越HAO。另外,要掌握HAO胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,Zui近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做HAO支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候ZuiHAO給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更HAO。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣GAO壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記HAO細胞名稱和凍存日期,同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝HAO細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,Zui后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,ZuiHAO取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
RIN-m細胞類似產品::MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞
HNE-2細胞類似產品::KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞
ST-2細胞類似產品::SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
LNT-229細胞類似產品::H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
HPAF2細胞類似產品::EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
MOLM-16細胞類似產品::McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
EO771細胞類似產品::NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞
SUM 149PT細胞類似產品::3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞
A375-S2細胞類似產品::Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
XWLC-05細胞類似產品::H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞
NCI-H1944細胞類似產品::RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
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RMG-1細胞類似產品::V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
EL4細胞類似產品::MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
PanC1細胞類似產品::TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞
aNK細胞類似產品::OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞
BC-009細胞類似產品::MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
SUDHL-10細胞類似產品::MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
Hep3B細胞類似產品::P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
H841細胞類似產品::B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞
EFM-192B細胞類似產品::NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞
SW 527細胞類似產品::UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
MGECs細胞類似產品::SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞
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769-P細胞類似產品::143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
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Fu97細胞類似產品::KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
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MDA-MB-134細胞類似產品::OVCA432細胞、Tu212細胞、624-mel細胞
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GA10細胞類似產品::H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
PNT1-a細胞類似產品::DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
MSTO-211細胞類似產品::HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
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VM Cub 1細胞類似產品::INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
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KM-12細胞類似產品::T8細胞、NCI-H1869細胞、SK-ES1細胞
32D.cl3細胞類似產品::Mouse Podocyte Clone-5細胞、Panc203細胞、USMC細胞
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上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。