過(guò)氧化氫酶（Catalase，簡(jiǎn)稱CAT）是一類廣泛存在于生物體內(nèi)的酶，其主要功能是催化過(guò)氧化氫（H?O?）分解為水和氧氣，從而保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激的損害。過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定對(duì)于理解生物體的抗氧化機(jī)制、評(píng)估氧化應(yīng)激狀態(tài)以及疾病診斷等方面具有重要意義。在眾多測(cè)定方法中，利用顯色底物ADPS（N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺鈉鹽）進(jìn)行光度法測(cè)定過(guò)氧化氫酶活性是一種靈敏、準(zhǔn)確且易于操作的方法。本文將詳細(xì)探討ADPS在過(guò)氧化氫酶活性測(cè)定中的應(yīng)用原理、方法、優(yōu)勢(shì)以及其在生物醫(yī)學(xué)研究中的具體應(yīng)用。
一、ADPS的顯色原理與過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定基礎(chǔ)
ADPS作為一種新型的Trinder's試劑，在辣根過(guò)氧化物酶（HRP）或過(guò)氧化物酶（POD）的催化作用下，能夠與過(guò)氧化氫等反應(yīng)物發(fā)生耦聯(lián)氧化反應(yīng)，生成醌亞胺類物質(zhì)。這種物質(zhì)在特定波長(zhǎng)下（如500nm）具有顯著的吸光度，使得ADPS成為生化分析中的優(yōu)質(zhì)顯色底物。在過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定中，ADPS的顯色原理為：過(guò)氧化氫酶催化過(guò)氧化氫分解產(chǎn)生氧氣和水，同時(shí)減少過(guò)氧化氫的濃度。當(dāng)過(guò)氧化氫與ADPS在酶的催化下發(fā)生反應(yīng)時(shí)，生成的醌亞胺類物質(zhì)的吸光度與過(guò)氧化氫的濃度成正比，因此可以通過(guò)測(cè)量吸光度的變化來(lái)間接反映過(guò)氧化氫酶的活性。
二、利用ADPS測(cè)定過(guò)氧化氫酶活性的方法
利用ADPS測(cè)定過(guò)氧化氫酶活性的方法通常包括以下幾個(gè)步驟：
1.樣品準(zhǔn)備：提取待測(cè)樣品中的過(guò)氧化氫酶，并調(diào)整其濃度至適當(dāng)?shù)姆秶?br />
2.反應(yīng)體系建立：將過(guò)氧化氫、ADPS以及必要的緩沖液和酶加入到反應(yīng)體系中。緩沖液用于維持反應(yīng)體系的酸堿度穩(wěn)定，確保酶的最佳活性。
3.反應(yīng)時(shí)間控制：在適當(dāng)?shù)臏囟认?，控制反?yīng)時(shí)間，使過(guò)氧化氫酶充分催化過(guò)氧化氫分解，并與ADPS發(fā)生顯色反應(yīng)。
4.吸光度測(cè)量：在特定波長(zhǎng)下（如500nm），使用分光光度計(jì)測(cè)量反應(yīng)體系的吸光度。
5.數(shù)據(jù)計(jì)算：根據(jù)吸光度的變化，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線或公式，計(jì)算出過(guò)氧化氫酶的活性。
三、ADPS在過(guò)氧化氫酶活性測(cè)定中的優(yōu)勢(shì)
1.高靈敏度：ADPS與過(guò)氧化氫的耦聯(lián)氧化反應(yīng)在酶的催化下能夠迅速發(fā)生，且生成的醌亞胺類物質(zhì)在特定波長(zhǎng)下具有顯著的吸光度，使得測(cè)定結(jié)果具有很高的靈敏度。
2.準(zhǔn)確性高：通過(guò)精確控制反應(yīng)條件，如溫度、時(shí)間、酸堿度等，可以確保測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。此外，ADPS的高穩(wěn)定性也保證了測(cè)定結(jié)果的可靠性。
3.操作簡(jiǎn)便：利用ADPS進(jìn)行過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定，只需將反應(yīng)物混合并測(cè)量吸光度，操作簡(jiǎn)便快捷，適用于大規(guī)模樣品檢測(cè)。
ADPS作為一種新型的Trinder's試劑，在過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定中展現(xiàn)出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。其高靈敏度、準(zhǔn)確性高、操作簡(jiǎn)便以及適用范圍廣等特點(diǎn)，使得ADPS成為過(guò)氧化氫酶活性測(cè)定的理想選擇。在生物醫(yī)學(xué)研究中，ADPS的應(yīng)用不僅限于過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定，還可以拓展到細(xì)胞氧化應(yīng)激研究、疾病模型構(gòu)建與評(píng)估、藥物篩選與研發(fā)以及生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)與驗(yàn)證等多個(gè)領(lǐng)域。
德晟是生產(chǎn)新型的Trinder's試劑的廠家，目前所生產(chǎn)的產(chǎn)品類型豐富齊全，ADPS就是其中一類，可用于多種領(lǐng)域里，當(dāng)然也可以根據(jù)企業(yè)自身使用情況進(jìn)行定制。同時(shí)公司配備自己的研發(fā)隊(duì)伍，可提供后續(xù)產(chǎn)品的一系列技術(shù)服務(wù)。如果您有相關(guān)需求，歡迎點(diǎn)擊網(wǎng)站或來(lái)電咨詢?cè)斍椋?/p>