Fludarabine有效抑制RPMI8226細(xì)胞增殖,呈時間濃度依賴性。Fludarabine處理MM.1S和MM.1R細(xì)胞48小時的IC50分別為13.48μg/mL和33.79μg/mL。而Fludarabine處理U266細(xì)胞48小時的IC 50為222.2μg/mL。Fludarabine處理可增加處于細(xì)胞周期G 1期的細(xì)胞數(shù)量，并伴隨著處于細(xì)胞周期S期細(xì)胞數(shù)量的減少，對細(xì)胞周期的影響呈時間依賴性。Fludarabine在MM細(xì)胞中誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡。Fludarabine時間依賴性的誘導(dǎo)caspase，-8，- 9和- 3，- 7的剪切，繼而誘導(dǎo)PARP的剪切 。氟達(dá)拉濱以時間梯度增加Bax基因表達(dá)，而Bak基因表達(dá)量不變。RPMI 8226細(xì)胞用Fludarabine處理12小時，處理后細(xì)胞膜電位降低，61.05%的細(xì)胞表達(dá)低熒光羅丹明123，而未處理的對照組細(xì)胞僅為8.62%^[1]。為提高溶解度，F(xiàn)ludarabine可制為一磷酸鹽形式(F-ara-AMP, fudarabine)，在靜脈滴注后即可即時、定量的從母核上去磷酸化。細(xì)胞內(nèi)重磷酸化修飾導(dǎo)致Fludarabine-阿糖胞苷三磷酸（(F-ara-ATP）。該代謝產(chǎn)物抑制了DNA復(fù)制的幾個關(guān)鍵過程，如DNA合成所需酶，比如核糖核酸還原酶，DNA引發(fā)酶，DNA聚合酶，具有3 ' - 5 '外切酶活性的脫氧核糖核酸聚合酶δ和ε和DNA連接酶^[2]。通過檢測ICAM - 1的表達(dá)和IL - 8釋放，表明Fludarabine還可以誘導(dǎo)前炎癥刺激單核細(xì)胞的增加^[3]。Fludarabine對卵巢癌細(xì)胞系生長無影響，而它對黑色素瘤細(xì)胞系有明顯的劑量依賴性抑制^[4]。Fludarabine是一種STAT1抑制劑，可特異性降低STAT1而不影響STAT1家族的其他成員^[5]。除了細(xì)胞質(zhì)積累外，重復(fù)低劑量順鉑(RLDC)還誘導(dǎo)HMGB1表達(dá)，該表達(dá)被STAT1敲除明顯抑制。Fludarabine在RLDC治療的腎小管細(xì)胞中始終呈劑量依賴性地抑制HMGB1的表達(dá)^[5]。

對地塞米松敏感(MM.1S) 和耐受 (MM.1R) 的人MM 細(xì)胞系, RPMI8226和 U266 細(xì)胞系以5 × 10⁵細(xì)胞密度鋪板，實(shí)驗(yàn)組均包括氟達(dá)拉濱處理和空白對照組。處理后細(xì)胞用PBS清洗兩次然后用70%冰乙醇固定，離心后用含100μg/mL核糖核酸酶PBS重懸浮，37ºC孵育30分鐘。樣品重懸于25μg/mL碘化吡啶中，用流式細(xì)胞儀檢測。根據(jù)產(chǎn)品說明用Annexin V-FITC試劑盒檢測細(xì)胞凋亡。利用TUNEL（末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)脫氧核苷酸缺口末端標(biāo)記）法和原位細(xì)胞凋亡檢測試劑盒處理細(xì)胞，最后用流式細(xì)胞儀分析。