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  2. Apoptosis
  3. TNF Receptor
  4. N-Formyl-Met-Leu-Phe

N-Formyl-Met-Leu-Phe  (Synonyms: fMLP; N-Formyl-MLF)

目錄號: HY-P0224 純度: 98.95%
COA 產(chǎn)品使用指南

N-Formyl-Met-Leu-Phe (fMLP; N-Formyl-MLF) 是一種趨化肽和N-甲?；氖荏w (FPR) 的特異性配體。報道顯示N-Formyl-Met-Leu-Ph 可抑制 TNF-alpha 的分泌。

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Custom Peptide Synthesis

N-Formyl-Met-Leu-Phe Chemical Structure

N-Formyl-Met-Leu-Phe Chemical Structure

CAS No. : 59880-97-6

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5 mg ￥500
In-stock
10 mg ￥900
In-stock
50 mg ￥1900
In-stock
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200 mg   詢價  

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Customer Review

  • 生物活性

  • 實驗參考方法

  • 純度 & 產(chǎn)品資料

  • 參考文獻

生物活性

N-Formyl-Met-Leu-Phe (fMLP; N-Formyl-MLF) is a chemotactic peptide and a specific ligand of N-formyl peptide receptor (FPR). N-Formyl-Met-Leu-Ph is reported to inhibit TNF-alpha secretion.

IC50 & Target

TNF-alpha[1]
細(xì)胞效力
(Cellular Effect)
Cell Line Type Value Description References
HL-60 EC50
0.01 μM
Compound: fMLF
Agonist activity at FPR1 expressed in human HL60 cells assessed as induction of intracellular calcium flux by FLIPR3 calcium assay
Agonist activity at FPR1 expressed in human HL60 cells assessed as induction of intracellular calcium flux by FLIPR3 calcium assay
[PMID: 19639995]
HL-60 EC50
1.9 μM
Compound: fMLF
Agonist activity at FPRL2 expressed in human HL60 cells assessed as induction of intracellular calcium flux by FLIPR3 calcium assay
Agonist activity at FPRL2 expressed in human HL60 cells assessed as induction of intracellular calcium flux by FLIPR3 calcium assay
[PMID: 19639995]
HL-60 EC50
20.4 μM
Compound: fMLF
Agonist activity at FPRL1 expressed in human HL60 cells assessed as induction of intracellular calcium flux by FLIPR3 calcium assay
Agonist activity at FPRL1 expressed in human HL60 cells assessed as induction of intracellular calcium flux by FLIPR3 calcium assay
[PMID: 19639995]
體外研究
(In Vitro)

N-Formyl-Met-Leu-Phe 與其特定細(xì)胞表面受體 N-甲?；氖荏w (FPR) 的結(jié)合會觸發(fā)不同的生化事件級聯(lián)，最終導(dǎo)致細(xì)胞活化。FPR 是屬于 G 蛋白偶聯(lián)受體家族的趨化受體。N-Formyl-Met-Leu-Phe 在成骨細(xì)胞分化條件下促進成骨細(xì)胞定型并抑制脂肪形成定型。N-Formyl-Met-Leu-Phe 刺激成骨與成骨標(biāo)記物和礦化的表達增加有關(guān)。N-Formyl-Met-Leu-Phe 抑制過氧化物酶體增殖物激活受體-γ1 的表達。N-Formyl-Met-Leu-Phe 刺激的成骨分化是通過 FPR1-磷脂酶 C/磷脂酶 D-Ca2+-鈣調(diào)蛋白依賴性激酶 II-ERK-CREB 信號通路介導(dǎo)的[1]。
N-Formyl-Met-Leu-Phe 是一種細(xì)菌衍生肽，可在人外周血單核細(xì)胞中誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子基因表達。細(xì)菌產(chǎn)物 LPS 和 N-Formyl-Met-Leu-Phe 通過多種信號通路協(xié)同誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)。TLR4、IKKβ-IκBα 和 NF-κB 信號通路通過 p65 核轉(zhuǎn)位依賴機制參與 TNF-α 的協(xié)同誘導(dǎo)[2]。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
體內(nèi)研究
(In Vivo)

N-Formyl-Met-Leu-Phe 促進斑馬魚和兔子的骨形成。在超過 80% 的 N-甲?；?Met-Leu-Phe 處理的斑馬魚中，5 dpf 的骨骼發(fā)育明顯。用 N-Formyl-Met-Leu-Phe 處理導(dǎo)致 Runx2 的表達增加。在 N-Formyl-Met-Leu-Phe 處理的顱骨中，骨髓腔廣泛形成，覆蓋骨的結(jié)締組織致密，如骨膜[1]。N-Formyl-Met-Leu-Phe 介導(dǎo)鈣衛(wèi)蛋白從 PMN 體外 釋放。它以劑量依賴性方式誘導(dǎo)鈣衛(wèi)蛋白從 PMN 中釋放。在 N-Formyl-Met-Leu-Phe 濃度為 0.1-10.0 nM 時，至少保留 10% 的總 PMN 鈣衛(wèi)蛋白[3]。

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分子量

437.55

Formula

C21H31N3O5S
CAS 號
性狀

固體

顏色

White to off-white

Sequence

Formyl-Met-Leu-Phe
Sequence Shortening

Formyl-MLF
運輸條件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
儲存方式

Sealed storage, away from moisture

Powder -80°C 2 years
-20°C 1 year

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)

溶解性數(shù)據(jù)
細(xì)胞實驗： 

DMSO 中的溶解度 : ≥ 82.5 mg/mL (188.55 mM; 吸濕的 DMSO 對產(chǎn)品的溶解度有顯著影響，請使用新開封的 DMSO)

H2O 中的溶解度 : < 0.1 mg/mL (insoluble)

* "≥" means soluble, but saturation unknown.

配制儲備液
濃度 溶劑體積 質(zhì)量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.2855 mL 11.4273 mL 22.8545 mL
5 mM 0.4571 mL 2.2855 mL 4.5709 mL
查看完整儲備液配制表

* 請根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液；一旦配成溶液，請分裝保存，避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
儲備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)。-80°C儲存時，請在6個月內(nèi)使用，-20°C儲存時，請在1個月內(nèi)使用。

  • 摩爾計算器

  • 稀釋計算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

質(zhì)量
=
濃度
×
體積
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

濃度 (start)

C1

×
體積 (start)

V1

=
濃度 (final)

C2

×
體積 (final)

V2

動物實驗：

請根據(jù)您的 實驗動物和給藥方式 選擇適當(dāng)?shù)娜芙夥桨浮?

以下溶解方案都請先按照 In Vitro 方式配制澄清的儲備液，再依次添加助溶劑：
——為保證實驗結(jié)果的可靠性，澄清的儲備液可以根據(jù)儲存條件，適當(dāng)保存；體內(nèi)實驗的工作液，建議您現(xiàn)用現(xiàn)配，當(dāng)天使用；
以下溶劑前顯示的百分比是指該溶劑在您配制終溶液中的體積占比；如在配制過程中出現(xiàn)沉淀、析出現(xiàn)象，可以通過加熱和/或超聲的方式助溶

  • 方案 一

    請依序添加每種溶劑： 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.75 mM); 澄清溶液

    此方案可獲得 ≥ 2.08 mg/mL（飽和度未知）的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液為例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 儲備液加到 400 μL PEG300 中，混合均勻；再向上述體系中加入 50 μL Tween-80，混合均勻；然后再繼續(xù)加入 450 μL 生理鹽水 定容至 1 mL。

    生理鹽水的配制：將 0.9 g 氯化鈉，溶解于 ddH?O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理鹽水溶液。
  • 方案 二

    請依序添加每種溶劑： 10% DMSO    90% Corn Oil

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.75 mM); 澄清溶液

    此方案可獲得 ≥ 2.08 mg/mL（飽和度未知）的澄清溶液，此方案實驗周期在半個月以上的動物實驗酌情使用。

    以 1 mL 工作液為例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 儲備液加到 900 μL玉米油中，混合均勻。

動物溶解方案計算器
請輸入動物實驗的基本信息：

給藥劑量

mg/kg

動物的平均體重

g

每只動物的給藥體積

μL

動物數(shù)量

只
由于實驗過程有損耗，建議您多配一只動物的量
請輸入您的動物體內(nèi)配方組成：
%
DMSO +
% 
+
%
Tween-80 +
%
Saline
如果您的動物是免疫缺陷鼠或者體弱鼠，建議 DMSO 中的在最后工作液體系中的占比盡量不超過 2%。
方案所需 助溶劑 包括：DMSO， ，均可在 MCE 網(wǎng)站選購。 ，Tween 80，均可在 MCE 網(wǎng)站選購。
計算結(jié)果
工作液所需濃度 : mg/mL
儲備液配制方法 : mg 藥物溶于 μL  DMSO（母液濃度為 mg/mL）。

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)

您所需的儲備液濃度超過該產(chǎn)品的實測溶解度，以下方案僅供參考，如有需要，請與 MCE 中國技術(shù)支持聯(lián)系。
動物實驗體內(nèi)工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 儲備液，加入 μL 。 μL ，混合均勻至澄清，再加 μL Tween 80，混合均勻至澄清，再加 μL 生理鹽水。
連續(xù)給藥周期超過半月以上，請謹(jǐn)慎選擇該方案。
請確保第一步儲備液溶解至澄清狀態(tài)，從左到右依次添加助溶劑。您可采用超聲加熱 （超聲清洗儀，建議頻次 20-40 kHz），渦旋吹打等方式輔助溶解。
純度 & 產(chǎn)品資料

純度: 99.36%

參考文獻
Cell Assay
[2]

Cells are cotransfected with either a dominant negative form of IκBα or a dominant negative form of IKKβ together with the NF-κB-dependent luciferase reporter plasmid. The plasmid pCMVβ is used as a control for transfection efficiency and this is monitored via the expression of β-galactosidase. Cells are transiently transfected with plasmids using DEAE-dextran. The transfected cells are cultivated for 48 h before a 6-h incubation in medium ±N-Formyl-Met-Leu-Phe, LPS, or N-Formyl-Met-Leu-Phe/LPS. Luciferase activity is determined by using the luciferase assay kit and a Monolight 3010 luminometer[2].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
Animal Administration
[2]

Mice: N-Formyl-Met-Leu-Phe is prepared in sterile PBS. Under the anesthesia, mice are intranasally treated with LPS (0.3 mg/kg) or N-Formyl-Met-Leu-Phe (0.5 mg/kg) or N-Formyl-Met-Leu-Phe and LPS in 50 μL of sterile PBS (control), BAL is performed by cannulating the trachea with sterilized PBS, and cells from BAL fluid are stained with Wright-Giemsa stain after cytocentrifuge. For TNF-α protein release, BAL fluid is collected and secreted TNF-α is measured by ELISA as described above[2].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
參考文獻

完整儲備液配制表

* 請根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液；一旦配成溶液，請分裝保存，避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
儲備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)。-80°C儲存時，請在6個月內(nèi)使用，-20°C儲存時，請在1個月內(nèi)使用。

可選溶劑 濃度 溶劑體積 質(zhì)量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
DMSO 1 mM 2.2855 mL 11.4273 mL 22.8545 mL 57.1363 mL
5 mM 0.4571 mL 2.2855 mL 4.5709 mL 11.4273 mL
10 mM 0.2285 mL 1.1427 mL 2.2855 mL 5.7136 mL
15 mM 0.1524 mL 0.7618 mL 1.5236 mL 3.8091 mL
20 mM 0.1143 mL 0.5714 mL 1.1427 mL 2.8568 mL
25 mM 0.0914 mL 0.4571 mL 0.9142 mL 2.2855 mL
30 mM 0.0762 mL 0.3809 mL 0.7618 mL 1.9045 mL
40 mM 0.0571 mL 0.2857 mL 0.5714 mL 1.4284 mL
50 mM 0.0457 mL 0.2285 mL 0.4571 mL 1.1427 mL
60 mM 0.0381 mL 0.1905 mL 0.3809 mL 0.9523 mL
80 mM 0.0286 mL 0.1428 mL 0.2857 mL 0.7142 mL
100 mM 0.0229 mL 0.1143 mL 0.2285 mL 0.5714 mL
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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