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  2. Immunology/Inflammation NF-κB Metabolic Enzyme/Protease
  3. Reactive Oxygen Species
  4. H2DCFDA

H2DCFDA  (Synonyms: DCFH-DA; 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate)

目錄號: HY-D0940 純度: 99.81%
COA 產(chǎn)品使用指南 技術(shù)支持

H2DCFDA (DCFH-DA) 是一種可滲透細(xì)胞的，用于檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧 (ROS) 的探針 (Ex/Em=488/525 nm)。

MCE 的所有產(chǎn)品僅用作科學(xué)研究或藥證申報(bào)，我們不為任何個人用途提供產(chǎn)品和服務(wù)

H2DCFDA Chemical Structure

H2DCFDA Chemical Structure

CAS No. : 4091-99-0

1.  客戶無需承擔(dān)相應(yīng)的運(yùn)輸費(fèi)用。

2.  同一機(jī)構(gòu)（單位）同一產(chǎn)品試用裝僅限申領(lǐng)一次，同一機(jī)構(gòu)（單位）一年內(nèi)

     可免費(fèi)申領(lǐng)三個不同產(chǎn)品的試用裝。

3.  試用裝只面向終端客戶。

規(guī)格 價(jià)格 是否有貨 數(shù)量
5 mg ￥156
In-stock
10 mg ￥250
In-stock
25 mg ￥370
In-stock
50 mg ￥500
In-stock
100 mg ￥700
In-stock
200 mg   詢價(jià)  
500 mg   詢價(jià)  

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Customer Review

MCE 顧客使用本產(chǎn)品發(fā)表的 364 篇科研文獻(xiàn)

IF

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: Acta Pharm Sin B. 16 July 2022.

    Treated HL-1 cells are washed three times and incubated with DMEM medium containing H2DCFDA (10 μM; 30 min) at 37 °C. The cells then are washed three times with warm DMEM medium and intracellular ROS production is detected by flow cytometry.

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: Adv Sci (Weinh). 2022 Mar 10;e2103317.  [Abstract]

    CLSM images of HUVEC cells using DCFH‐DA (0.5 hours) as the fluorescent probe: Control, H2O2, H2O2+10 μg/mL1 PDA NPs, H2O2+40 μg/mL PDA NPs, H2O2+80 μg/mL PDA NPs.

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: Biomaterials. 2022 Sep 30;290:121842.  [Abstract]

    DCFH-DA (10 μM; 30 min) or C11-BODIPY-labeled cells are substantially increased after treatment with 1 μM FeSO4.

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: Biomaterials. 2022 May;284:121513.  [Abstract]

    DCFH-DA (10 μM; 30 min). The ROS generation in 4T1 cells and NIH-3T3 cells incubated with various formulations for 4 h observed by CLSM.

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: Biomaterials. 2022 Jul 21;287:121688.  [Abstract]

    CLSM images of 4T1 tumor cells stained with DCFH-DA (15 min) after different treatments.

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: J Hazard Mater. 2022 Oct 5;439:129502.  [Abstract]

    Representative DCFH-DA (10 μM; 30 min) staining images (Green) in PBNs exposed PSNPs and/or LPS in vivo and in vitro.

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: Cell. 2021 Jun 24;184(13):3528-3541.e12.  [Abstract]

    Stained protoplasts with H2DCFDA for the detection of ROS production and PI for PM integrity and tracked the process by live-cell imaging.

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: ACS Nano. 2021 Oct 26;15(10):16286-16297.  [Abstract]

    CLSM image of 4T1 cells after being treated with MM, MMP, and MMTP; cells are stained with DCFH-DA (20 μM; for 1 h).

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: Biomaterials. 2021 Oct;277:121103.  [Abstract]

    In vitro experiments are conducted to measure the cellular ROS levels in A549 cells from different treatments via flow cytometry using fluorescent probe H2DCFDA (5 μM; 30 min) to better understand the potential molecular mechanism of SOD@ARA290-HBc on radiation-induced lung injury. H2DCFDA fluorescence intensity in A549 cells significantly increased after irradiation.

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: Small. 2021 Aug;17(32):e2101368.  [Abstract]

    Laser scanning confocal fluorescence microscopy images of HT-1080 cells treated with different nanodrugs for the detection of intracellular lipid peroxidation and total ROS using C11-BODIPY and DCFH-DA (100 nM; 10 min) as the corresponding fluorescence probes.

    H2DCFDA purchased from MCE. Usage Cited in: Curr Biol. 2021 May 18;S0960-9822(21)00607-2.  [Abstract]

    Co-staining stigmas with H2DCFDA (50 μM; for 1-2 hours) and the cell wall indicator propidium iodide (PI) shows that ROS is located in the cytoplasm of papilla cells, near the periphery of the plasma membrane.

    • 生物活性

    • 實(shí)驗(yàn)參考方法

    • 純度 & 產(chǎn)品資料

    • 參考文獻(xiàn)

    生物活性

    H2DCFDA (DCFH-DA) is a cell-permeable probe used to detect intracellular reactive oxygen species (ROS) (Ex/Em=488/525 nm)[1].

    體外研究
    (In Vitro)

    指南 (以下是我們推薦的方案，本方案僅提供指南，應(yīng)根據(jù)您的具體需要進(jìn)行修改)。
    1.1 制備儲存液
    用 無水 DMSO 配制 5 mM 的 H2DCFDA 儲備液。
    注：H2DCFDA 儲存液建議分裝后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
    1.2 工作液的配制
    用預(yù)熱好的無血清細(xì)胞培養(yǎng)基或 PBS 稀釋儲存液，配制成 1-10 μM 的 H2DCFDA工作液。
    注：請根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整 H2DCFDA 工作液濃度，且現(xiàn)用現(xiàn)配。
    2. 細(xì)胞染色（懸浮細(xì)胞）
    2.1 離心收集細(xì)胞，加入 PBS 洗滌兩次，每次 5 分鐘。細(xì)胞密度在 1×106 /mL。
    2.2 加入 1 mL 染料 工作液，室溫孵育 5-30 分鐘。
    2.3 400 g，離心 3-4 分鐘，棄去上清。
    2.4 加入 PBS 洗滌細(xì)胞兩次，每次 5 分鐘。
    2.5 用 1 mL 無血清培養(yǎng)基或 PBS 重懸細(xì)胞后，使用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行觀察。
    3. 細(xì)胞染色（貼壁細(xì)胞）
    3.1 將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。
    3.2 從培養(yǎng)基中移出蓋玻片，吸除多余培養(yǎng)基。
    3.3 加入 100 μL 染料工作液，輕輕晃動使其完全覆蓋細(xì)胞，孵育 5-30 分鐘。
    3.4 吸去染料工作液，用培養(yǎng)基洗 2-3 次，每次 5 分鐘 ，使用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行 觀察。
    注：若需要用流式細(xì)胞儀檢測，需將細(xì)胞用胰蛋白酶消化重懸后再進(jìn)行染色。

    MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
    分子量

    487.29

    Formula

    C24H16Cl2O7
    CAS 號
    性狀

    固體

    顏色

    White to off-white

    Emission (Em)

    517
    Excitation (Ex)

    492
    運(yùn)輸條件

    Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
    儲存方式

    -20°C, protect from light

    *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

    溶解性數(shù)據(jù)
    細(xì)胞實(shí)驗(yàn)： 

    DMSO 中的溶解度 : 125 mg/mL (256.52 mM; 超聲助溶; 吸濕的 DMSO 對產(chǎn)品的溶解度有顯著影響，請使用新開封的 DMSO)

    Ethanol 中的溶解度 : 20 mg/mL (41.04 mM; 超聲助溶)

    配制儲備液
    濃度 溶劑體積 質(zhì)量 1 mg 5 mg 10 mg
    1 mM 2.0522 mL 10.2608 mL 20.5217 mL
    5 mM 0.4104 mL 2.0522 mL 4.1043 mL
    查看完整儲備液配制表

    * 請根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液；一旦配成溶液，請分裝保存，避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
    儲備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C儲存時，請?jiān)?個月內(nèi)使用，-20°C儲存時，請?jiān)?個月內(nèi)使用。

    • 摩爾計(jì)算器

    • 稀釋計(jì)算器

    Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

    質(zhì)量
    =
    濃度
    ×
    體積
    ×
    分子量 *

    Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

    This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

    濃度 (start)

    C1

    ×
    體積 (start)

    V1

    =
    濃度 (final)

    C2

    ×
    體積 (final)

    V2

    動物實(shí)驗(yàn)：

    請根據(jù)您的 實(shí)驗(yàn)動物和給藥方式 選擇適當(dāng)?shù)娜芙夥桨浮?

    以下溶解方案都請先按照 In Vitro 方式配制澄清的儲備液，再依次添加助溶劑：
    ——為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，澄清的儲備液可以根據(jù)儲存條件，適當(dāng)保存；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的工作液，建議您現(xiàn)用現(xiàn)配，當(dāng)天使用；
    以下溶劑前顯示的百分比是指該溶劑在您配制終溶液中的體積占比；如在配制過程中出現(xiàn)沉淀、析出現(xiàn)象，可以通過加熱和/或超聲的方式助溶

    • 方案 一

      請依序添加每種溶劑： 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

      Solubility: 2.08 mg/mL (4.27 mM); 懸濁液; 超聲助溶

      此方案可獲得 2.08 mg/mL的均勻懸濁液，懸濁液可用于口服和腹腔注射。

      以 1 mL 工作液為例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 儲備液加到 400 μL PEG300 中，混合均勻；再向上述體系中加入 50 μL Tween-80，混合均勻；然后再繼續(xù)加入 450 μL 生理鹽水 定容至 1 mL。

      生理鹽水的配制：將 0.9 g 氯化鈉，溶解于 ddH?O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理鹽水溶液。
    • 方案 二

      請依序添加每種溶劑： 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

      Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.27 mM); 澄清溶液

      此方案可獲得 ≥ 2.08 mg/mL（飽和度未知）的澄清溶液。

      以 1 mL 工作液為例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 儲備液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理鹽水水溶液 中，混合均勻。

      2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-環(huán)糊精）粉末定容于 10 mL 的生理鹽水中，完全溶解至澄清透明。
    動物溶解方案計(jì)算器
    請輸入動物實(shí)驗(yàn)的基本信息：

    給藥劑量

    mg/kg

    動物的平均體重

    g

    每只動物的給藥體積

    μL

    動物數(shù)量

    只
    由于實(shí)驗(yàn)過程有損耗，建議您多配一只動物的量
    請輸入您的動物體內(nèi)配方組成：
    %
    DMSO +
    % 
    +
    %
    Tween-80 +
    %
    Saline
    如果您的動物是免疫缺陷鼠或者體弱鼠，建議 DMSO 中的在最后工作液體系中的占比盡量不超過 2%。
    方案所需 助溶劑 包括：DMSO， ，均可在 MCE 網(wǎng)站選購。 ，Tween 80，均可在 MCE 網(wǎng)站選購。
    計(jì)算結(jié)果
    工作液所需濃度 : mg/mL
    儲備液配制方法 : mg 藥物溶于 μL  DMSO（母液濃度為 mg/mL）。

    *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

    您所需的儲備液濃度超過該產(chǎn)品的實(shí)測溶解度，以下方案僅供參考，如有需要，請與 MCE 中國技術(shù)支持聯(lián)系。
    動物實(shí)驗(yàn)體內(nèi)工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 儲備液，加入 μL 。 μL ，混合均勻至澄清，再加 μL Tween 80，混合均勻至澄清，再加 μL 生理鹽水。
    連續(xù)給藥周期超過半月以上，請謹(jǐn)慎選擇該方案。
    請確保第一步儲備液溶解至澄清狀態(tài)，從左到右依次添加助溶劑。您可采用超聲加熱 （超聲清洗儀，建議頻次 20-40 kHz），渦旋吹打等方式輔助溶解。
    純度 & 產(chǎn)品資料

    純度: 99.82%

    染色示例
    參考文獻(xiàn)
    Kinase Assay

    ROS Measurements[1]
    For the detection of intracellular ROS level ,ROS-sensitive probe H2DCFDA is used. Adherent cells (ESCs, difESCs, eMSCs, HeLa, U118) are incubated with 5 μM staining solution in PBS in the dark for 30 min at 37°C, then harvested with 0.05% trypsin-EDTA solution, suspended in a fresh medium, and immediately analyzed with flow cytometer. Lymphocytes, both control and PHA-activated, are resuspended in PBS, incubated with 5 μM of H2DCFDA in the dark for 30 min at 37°C, and immediately analyzed. Along with the H2DCFDA probe, if indicated, ROS-insensitive modification of the fluorescent dye DCFDA is used. The staining procedure is the same as for the H2DCFDA[1].

    MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
    參考文獻(xiàn)

    完整儲備液配制表

    * 請根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液；一旦配成溶液，請分裝保存，避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
    儲備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C儲存時，請?jiān)?個月內(nèi)使用，-20°C儲存時，請?jiān)?個月內(nèi)使用。

    可選溶劑 濃度 溶劑體積 質(zhì)量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
    Ethanol / DMSO 1 mM 2.0522 mL 10.2608 mL 20.5217 mL 51.3042 mL
    5 mM 0.4104 mL 2.0522 mL 4.1043 mL 10.2608 mL
    10 mM 0.2052 mL 1.0261 mL 2.0522 mL 5.1304 mL
    15 mM 0.1368 mL 0.6841 mL 1.3681 mL 3.4203 mL
    20 mM 0.1026 mL 0.5130 mL 1.0261 mL 2.5652 mL
    25 mM 0.0821 mL 0.4104 mL 0.8209 mL 2.0522 mL
    30 mM 0.0684 mL 0.3420 mL 0.6841 mL 1.7101 mL
    40 mM 0.0513 mL 0.2565 mL 0.5130 mL 1.2826 mL
    DMSO 50 mM 0.0410 mL 0.2052 mL 0.4104 mL 1.0261 mL
    60 mM 0.0342 mL 0.1710 mL 0.3420 mL 0.8551 mL
    80 mM 0.0257 mL 0.1283 mL 0.2565 mL 0.6413 mL
    100 mM 0.0205 mL 0.1026 mL 0.2052 mL 0.5130 mL
    Help & FAQs
    • Do most proteins show cross-species activity?

      Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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