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  2. Others
  3. Fluorescent Dye
  4. Fluorescein-5-maleimide

Fluorescein-5-maleimide  (Synonyms: 熒光素-5-馬來酰亞胺; N-(5-Fluoresceinyl)maleimide)

目錄號(hào): HY-D0098 純度: 99.05%
COA 產(chǎn)品使用指南 技術(shù)支持

Fluorescein-5-maleimide 是一種熒光染料。Fluorescein-5-maleimide 可以檢測(cè)真核細(xì)胞中的硫醇氧化還原狀態(tài)。Fluorescein-5-maleimide 可以標(biāo)記肽并用于檢測(cè)帶負(fù)電荷的納米顆粒。Fluorescein-5-maleimide 可以標(biāo)記肌動(dòng)蛋白來探究其與心肌肌球蛋白結(jié)合蛋白C (cMyBP-C) 的相互作用，從而幫助開發(fā)小分子調(diào)節(jié)劑用于心力衰竭。Fluorescein-5-maleimide 可以篩選含有半胱氨酸殘基的突變蛋白。Fluorescein-5-maleimide 的激發(fā)波長(zhǎng)為 494 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為 519 nm。

MCE 的所有產(chǎn)品僅用作科學(xué)研究或藥證申報(bào)，我們不為任何個(gè)人用途提供產(chǎn)品和服務(wù)

Fluorescein-5-maleimide Chemical Structure

Fluorescein-5-maleimide Chemical Structure

CAS No. : 75350-46-8

1.  客戶無需承擔(dān)相應(yīng)的運(yùn)輸費(fèi)用。

2.  同一機(jī)構(gòu)（單位）同一產(chǎn)品試用裝僅限申領(lǐng)一次，同一機(jī)構(gòu)（單位）一年內(nèi)

     可免費(fèi)申領(lǐng)三個(gè)不同產(chǎn)品的試用裝。

3.  試用裝只面向終端客戶。

規(guī)格 價(jià)格 是否有貨 數(shù)量
5 mg ￥375
In-stock
10 mg ￥600
In-stock
25 mg ￥1200
In-stock
50 mg ￥2100
In-stock
100 mg   詢價(jià)  
200 mg   詢價(jià)  

* Please select Quantity before adding items.

Customer Review

  • 生物活性

  • 純度 & 產(chǎn)品資料

  • 參考文獻(xiàn)

生物活性

Fluorescein-5-maleimide (N-(5-Fluoresceinyl)maleimide) is a fluorescent dye. Fluorescein-5-maleimide can be used to detect the redox state of thiols in eukaryotic cells. Fluorescein-5-maleimide can label peptides and is used to detect negatively charged nanoparticles. Fluorescein-5-maleimide can also label actin to explore its interaction with cardiac myosin-binding protein C (cMyBP-C), which helps in developing small molecule modulators for heart failure. Fluorescein-5-maleimide can screen mutant proteins that contain cysteine residues. The excitation wavelength of Fluorescein-5-maleimide is 494 nm, and the emission wavelength is 519 nm[1][2][3][4].
體外研究
(In Vitro)

Fluorescein-5-maleimide 熒光探針的配制[1]
1.1 制備儲(chǔ)存液
用 d-PBS 配制 1 mM 的 Fluorescein-5-maleimide 儲(chǔ)存液。
注：1) 避光保存。
Fluorescein-5-maleimide 用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫醇氧化還原狀態(tài)
1) 使用 Ficoll-Paque 密度離心法從靜脈血中制備 PBMC，并在 d-PBS 中洗滌。
2) 清洗過的 PBMC (100 μL 中有 106 個(gè)細(xì)胞) 用抗人 CD3-APC 標(biāo)記。
3) 用 0.1 μM Fluorescein-5-maleimide 染色，并通過流式細(xì)胞術(shù)分析。

Fluorescein-5-maleimide 熒光探針的配制[2]
1.1 制備工作液
用 DMSO 配制 50 mM 的 Fluorescein-5-maleimide。
Fluorescein-5-maleimide 熒光探針用于檢測(cè)納米顆粒
1) 將工作液以 5: 1 的摩爾比 (探針: 肽) 加入到含有 20.3 mM N-(2-羥乙基) 哌嗪-N’-乙磺酸-KOH、50 mM KCl 和 2 mM 三 (2-羧乙基) 膦的緩沖液的肽溶液 (4.06 mM) 中，用于標(biāo)記肽。
2) 將 1) 中混合物 (終體積為 125 μL) 在室溫下黑暗孵育 2 小時(shí)，并輕輕搖動(dòng)。
3) 加入過量的 DDT (20 mM) 來淬滅反應(yīng)。
4) 通過丙酮 (1 mL) 沉淀進(jìn)一步純化純標(biāo)記肽混合物。
5) 將 5 μL 熒光探針添加到 15 μL 的納米粒子和 130 μL 的緩沖溶液中，檢測(cè)兩者相互作用。
6) 數(shù)據(jù)分析：通過標(biāo)記肽的熒光強(qiáng)度變化或/和差分光散射來檢測(cè)納米顆粒-肽相互作用。

Fluorescein-5-maleimide 用于檢測(cè)蛋白相互作用 (肌動(dòng)蛋白與心肌肌球蛋白結(jié)合蛋白C (cMyBP-C))[3]
1) 將 50 μM 的 G-肌動(dòng)蛋白在 20 mM Tris pH 7.5、0.2 mM CaCl2、0.2 mM ATP 的條件下，加入 3 M KCl (最終濃度為 100 mM) 和 0.5 M MgCl2 (最終濃度為 2 mM) 進(jìn)行聚合，在 23 °C 下孵育 1 小時(shí)。
2) 加入 Fluorescein-5-maleimide (終濃度為 1 mM) ，在 23 °C 下標(biāo)記 1 小時(shí)。
3) 加入五倍摩爾、過量的 DTT 來停止標(biāo)記。
4) 將 0.25 μM 的 Fluorescein-5-maleimide-肌動(dòng)蛋白和 0-20 μM 的 TMR-cC0-C2 (cMyBP-C 的 N 末端片段) 共同孵育。
5) 數(shù)據(jù)分析 (FLT-FRET 測(cè)定)：首先激發(fā) Fluorescein-5-maleimide 并檢測(cè)其 FLT，以測(cè)量從 Fluorescein-5-maleimide (供體) 到 TMR (受體) 的熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (FRET) 的變化，F(xiàn)luorescein-5-maleimide-肌動(dòng)蛋白的 FLT 降低 (FRET 增加) 表明結(jié)合。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
分子量

427.36

Formula

C24H13NO7
CAS 號(hào)
性狀

固體

顏色

Yellow to orange

Emission (Em)

505
Excitation (Ex)

488
中文名稱

熒光素-5-馬來酰亞胺
運(yùn)輸條件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
儲(chǔ)存方式

-20°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

溶解性數(shù)據(jù)
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)： 

DMSO 中的溶解度 : 50 mg/mL (117.00 mM; 超聲助溶; 吸濕的 DMSO 對(duì)產(chǎn)品的溶解度有顯著影響，請(qǐng)使用新開封的 DMSO)

配制儲(chǔ)備液
濃度 溶劑體積 質(zhì)量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3399 mL 11.6997 mL 23.3995 mL
5 mM 0.4680 mL 2.3399 mL 4.6799 mL
查看完整儲(chǔ)備液配制表

* 請(qǐng)根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲(chǔ)備液；一旦配成溶液，請(qǐng)分裝保存，避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
儲(chǔ)備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C儲(chǔ)存時(shí)，請(qǐng)?jiān)?個(gè)月內(nèi)使用，-20°C儲(chǔ)存時(shí)，請(qǐng)?jiān)?個(gè)月內(nèi)使用。

  • 摩爾計(jì)算器

  • 稀釋計(jì)算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

質(zhì)量
=
濃度
×
體積
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

濃度 (start)

C1

×
體積 (start)

V1

=
濃度 (final)

C2

×
體積 (final)

V2

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：

請(qǐng)根據(jù)您的 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和給藥方式 選擇適當(dāng)?shù)娜芙夥桨浮?

以下溶解方案都請(qǐng)先按照 In Vitro 方式配制澄清的儲(chǔ)備液，再依次添加助溶劑：
——為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，澄清的儲(chǔ)備液可以根據(jù)儲(chǔ)存條件，適當(dāng)保存；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的工作液，建議您現(xiàn)用現(xiàn)配，當(dāng)天使用；
以下溶劑前顯示的百分比是指該溶劑在您配制終溶液中的體積占比；如在配制過程中出現(xiàn)沉淀、析出現(xiàn)象，可以通過加熱和/或超聲的方式助溶

  • 方案 一

    請(qǐng)依序添加每種溶劑： 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

    Solubility: 2.5 mg/mL (5.85 mM); 懸濁液; 超聲助溶

    此方案可獲得 2.5 mg/mL的均勻懸濁液，懸濁液可用于口服和腹腔注射。

    以 1 mL 工作液為例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 儲(chǔ)備液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理鹽水水溶液 中，混合均勻。

    2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-環(huán)糊精）粉末定容于 10 mL 的生理鹽水中，完全溶解至澄清透明。
  • 方案 二

    請(qǐng)依序添加每種溶劑： 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

    Solubility: 2.08 mg/mL (4.87 mM); 懸濁液; 超聲助溶

    此方案可獲得 2.08 mg/mL的均勻懸濁液，懸濁液可用于口服和腹腔注射。

    以 1 mL 工作液為例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 儲(chǔ)備液加到 400 μL PEG300 中，混合均勻；再向上述體系中加入 50 μL Tween-80，混合均勻；然后再繼續(xù)加入 450 μL 生理鹽水 定容至 1 mL。

    生理鹽水的配制：將 0.9 g 氯化鈉，溶解于 ddH?O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理鹽水溶液。
動(dòng)物溶解方案計(jì)算器
請(qǐng)輸入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本信息：

給藥劑量

mg/kg

動(dòng)物的平均體重

g

每只動(dòng)物的給藥體積

μL

動(dòng)物數(shù)量

只
由于實(shí)驗(yàn)過程有損耗，建議您多配一只動(dòng)物的量
請(qǐng)輸入您的動(dòng)物體內(nèi)配方組成：
%
DMSO +
% 
+
%
Tween-80 +
%
Saline
如果您的動(dòng)物是免疫缺陷鼠或者體弱鼠，建議 DMSO 中的在最后工作液體系中的占比盡量不超過 2%。
方案所需 助溶劑 包括：DMSO， ，均可在 MCE 網(wǎng)站選購(gòu)。 ，Tween 80，均可在 MCE 網(wǎng)站選購(gòu)。
計(jì)算結(jié)果
工作液所需濃度 : mg/mL
儲(chǔ)備液配制方法 : mg 藥物溶于 μL  DMSO（母液濃度為 mg/mL）。

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

您所需的儲(chǔ)備液濃度超過該產(chǎn)品的實(shí)測(cè)溶解度，以下方案僅供參考，如有需要，請(qǐng)與 MCE 中國(guó)技術(shù)支持聯(lián)系。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)體內(nèi)工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 儲(chǔ)備液，加入 μL 。 μL ，混合均勻至澄清，再加 μL Tween 80，混合均勻至澄清，再加 μL 生理鹽水。
連續(xù)給藥周期超過半月以上，請(qǐng)謹(jǐn)慎選擇該方案。
請(qǐng)確保第一步儲(chǔ)備液溶解至澄清狀態(tài)，從左到右依次添加助溶劑。您可采用超聲加熱 （超聲清洗儀，建議頻次 20-40 kHz），渦旋吹打等方式輔助溶解。
純度 & 產(chǎn)品資料

純度: 99.05%

參考文獻(xiàn)

完整儲(chǔ)備液配制表

* 請(qǐng)根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲(chǔ)備液；一旦配成溶液，請(qǐng)分裝保存，避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
儲(chǔ)備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C儲(chǔ)存時(shí)，請(qǐng)?jiān)?個(gè)月內(nèi)使用，-20°C儲(chǔ)存時(shí)，請(qǐng)?jiān)?個(gè)月內(nèi)使用。

可選溶劑 濃度 溶劑體積 質(zhì)量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
DMSO 1 mM 2.3399 mL 11.6997 mL 23.3995 mL 58.4987 mL
5 mM 0.4680 mL 2.3399 mL 4.6799 mL 11.6997 mL
10 mM 0.2340 mL 1.1700 mL 2.3399 mL 5.8499 mL
15 mM 0.1560 mL 0.7800 mL 1.5600 mL 3.8999 mL
20 mM 0.1170 mL 0.5850 mL 1.1700 mL 2.9249 mL
25 mM 0.0936 mL 0.4680 mL 0.9360 mL 2.3399 mL
30 mM 0.0780 mL 0.3900 mL 0.7800 mL 1.9500 mL
40 mM 0.0585 mL 0.2925 mL 0.5850 mL 1.4625 mL
50 mM 0.0468 mL 0.2340 mL 0.4680 mL 1.1700 mL
60 mM 0.0390 mL 0.1950 mL 0.3900 mL 0.9750 mL
80 mM 0.0292 mL 0.1462 mL 0.2925 mL 0.7312 mL
100 mM 0.0234 mL 0.1170 mL 0.2340 mL 0.5850 mL
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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Fluorescein-5-maleimide
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