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  2. Others
  3. Biochemical Assay Reagents
  4. Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg)

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg)  (Synonyms: Pronase (Activity ≥ 4000 U/mg))

目錄號: HY-114158A
COA 產(chǎn)品使用指南 技術(shù)支持

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) 是從灰色鏈霉菌 (Streptomyces griseus) 中獲得的一種蛋白水解酶混合物，能夠?qū)⒌鞍踪|(zhì)消化成單個氨基酸。

MCE 的所有產(chǎn)品僅用作科學(xué)研究或藥證申報，我們不為任何個人用途提供產(chǎn)品和服務(wù)

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) Chemical Structure

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) Chemical Structure

CAS No. : 9036-06-0

1.  客戶無需承擔(dān)相應(yīng)的運輸費用。

2.  同一機構(gòu)（單位）同一產(chǎn)品試用裝僅限申領(lǐng)一次，同一機構(gòu)（單位）一年內(nèi)

     可免費申領(lǐng)三個不同產(chǎn)品的試用裝。

3.  試用裝只面向終端客戶。

規(guī)格 價格 是否有貨 數(shù)量
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Customer Review

Other Forms of Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg):

  • 生物活性

  • 純度 & 產(chǎn)品資料

  • 參考文獻(xiàn)

生物活性

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) is a mixture of proteolytic enzymes that is obtained from Streptomyces griseus and could digest protein into individual amino acids[1].

體外研究
(In Vitro)

Pronase E 顯著增加了所分析的大多數(shù)氨基酸的量 (PE 與 C)，尤其是 Ile、His 和 Thr[1]。

Pronase E 使用步驟：
1. 儲備液的制備：
(1) 將 Pronase E 溶解于去離子水中，配制成 5-20 mg/ml 的儲備液。
注：如用于 DNA 或 RNA 分離步驟，建議先將溶液在 56°C 下加熱 15 分鐘。
(2) 在 37°C 下孵育 1 小時。 將制備好的儲備液分裝為一次性等分試樣，存儲于 -20°C，通?？煞€(wěn)定保存一年。
2. DNA 分離：
直接將 Pronase E 添加到 DNA 制備系統(tǒng)中。 制備系統(tǒng)應(yīng)含有 0.5-1% 的 SDS，以破壞 DNA 與蛋白質(zhì)的相互作用。
注：使用濃度 250-500 μg 蛋白質(zhì)/mL。 孵育條件：37°C 下孵育 1-4 小時。
3. 蛋白質(zhì)消化：
(1) 將大約 0.2 μM 的蛋白質(zhì)溶解在 0.2 ml 的 50 mM 碳酸氫銨緩沖液（pH 8.0）或磷酸鹽緩沖液（pH 7.0）中。
(2) 添加 1%（w/w）的鏈霉蛋白酶 E。 在 37°C 下孵育 24 小時，以進(jìn)行蛋白質(zhì)消化。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
體內(nèi)研究
(In Vivo)

使用 Pronase E 分離小鼠原代造血干細(xì)胞 (HSC) 的實驗步驟[2]
1. 動物麻醉與腹腔暴露：
(1) 對雄性或雌性小鼠進(jìn)行麻醉。
(2) 在無菌操作下，通過腹腔切開術(shù)暴露肝臟。
2. 肝臟灌注操作：
(1) 使用 Hanks 緩沖鹽溶液（HBSS）從門靜脈對肝臟進(jìn)行灌注，目的是清除血液和雜質(zhì)。
(2) 進(jìn)行鏈霉蛋白酶 E 和膠原酶的酶促灌注，以解離肝臟組織。
3. 肝臟提取與細(xì)胞釋放：
(1) 使用無菌鑷子將肝臟從腹腔內(nèi)輕柔取出，并迅速轉(zhuǎn)移至無菌培養(yǎng)皿中。
(2) 小心剝離肝包膜，通過溫和的機械震蕩促使細(xì)胞從肝組織中釋放。
4. 細(xì)胞消化與初步離心分離：
(1) 將所得細(xì)胞懸浮于含有鏈霉蛋白酶 E、膠原酶及 DNase 的混合酶溶液中，并在 37°C 條件下消化 20 分鐘。
(2) 通過兩次低速離心 (50 g，3 分鐘) 分離肝細(xì)胞，收集細(xì)胞懸液。
5. HSC 的分離與密度梯度離心：
(1) 對細(xì)胞懸液進(jìn)行進(jìn)一步的離心處理（450 g，8 分鐘），收集沉淀部分。
(2) 將沉淀物重新懸浮于 18% 的 Nycodenz 溶液中，作為密度梯度分離的基礎(chǔ)。
(3) 構(gòu)建密度梯度，依次為 12% Nycodenz、8.2% Nycodenz 以及 Gey 平衡鹽溶液 (GBSS)。
(4) 通過密度梯度離心，從 8.2% Nycodenz 層中分離并純化造血干細(xì)胞 (HSC)。
注：此方案提供了標(biāo)準(zhǔn)操作流程，實際實驗中請根據(jù)具體實驗需求和條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整和優(yōu)化。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
CAS 號
性狀

固體

顏色

Off-white to light yellow

結(jié)構(gòu)分類
初始來源

Streptomyces griseus
運輸條件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
儲存方式

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.
溶解性數(shù)據(jù)
細(xì)胞實驗： 

H2O 中的溶解度 : ≥ 66.67 mg/mL

* "≥" means soluble, but saturation unknown.

  • 摩爾計算器

  • 稀釋計算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

質(zhì)量
=
濃度
×
體積
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

濃度 (start)

C1

×
體積 (start)

V1

=
濃度 (final)

C2

×
體積 (final)

V2

動物實驗：

以下溶解方案，請直接配制工作液。建議現(xiàn)用現(xiàn)配，在短期內(nèi)盡快用完。 以下溶劑前顯示的百分比是指該溶劑在您配制終溶液中的體積占比； 如在配制過程中出現(xiàn)沉淀、析出現(xiàn)象，可以通過加熱和/或超聲的方式助溶。

  • 方案 一

    請依序添加每種溶劑： PBS

    Solubility: 50 mg/mL; 澄清溶液; 超聲助溶

動物溶解方案計算器
請輸入動物實驗的基本信息：

給藥劑量

mg/kg

動物的平均體重

g

每只動物的給藥體積

μL

動物數(shù)量

只
由于實驗過程有損耗，建議您多配一只動物的量
計算結(jié)果
工作液所需濃度 : mg/mL
該產(chǎn)品水溶性佳，請具體參考實測 水 / PBS / Saline 中的溶解度數(shù)據(jù)。
您所需的儲備液濃度超過該產(chǎn)品的實測溶解度，如有需要，請與 MCE 中國技術(shù)支持聯(lián)系。
純度 & 產(chǎn)品資料

參考文獻(xiàn)
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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