"Clone M-3：小鼠黑色素瘤傳代細(xì)胞
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；雄性；DBA
U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞
CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Clone M-3：小鼠黑色素瘤傳代細(xì)胞
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
MDA-MB-231 #4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC 1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Clone M-3：小鼠黑色素瘤傳代細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
HAPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO細(xì)胞、H1944細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞
HeLa S 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-38細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞、L-363細(xì)胞
A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞
H-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-F細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞、H-1703細(xì)胞
因為細(xì)胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細(xì)胞，單個細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團的細(xì)胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細(xì)胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非常考究你的功夫的！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細(xì)胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細(xì)胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細(xì)胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。
Gerner 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細(xì)胞、RT 112細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞
SUP-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-2a細(xì)胞、A-431細(xì)胞、SN12C細(xì)胞
HEK293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、SupT1細(xì)胞
OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WML2細(xì)胞、MBT2細(xì)胞、H-2591細(xì)胞
Med 283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT5A細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞、MS751細(xì)胞
MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞
SCLC-21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞
HCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
CEMC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞
C-Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-780細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞
TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞
KU-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞、HT細(xì)胞
NGP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C1細(xì)胞、K299細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞
DHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞、SBC5細(xì)胞
DHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞、SBC5細(xì)胞
WM-2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mahlavu細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞
GM04680細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞
SKMEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細(xì)胞、ST 486細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞
HOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT(H9)細(xì)胞、GDM1細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞
P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞
KTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞
TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞
293T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-64細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞、SMA560細(xì)胞
HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞
Clone M-3：小鼠黑色素瘤傳代細(xì)胞
HEY-A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1395細(xì)胞、SNU520細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞
HL-60 clone15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLOY4細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞
MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞
U-266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA.hy 926細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞
KYSE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1573細(xì)胞、BJ1細(xì)胞、H1299細(xì)胞
XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 2132細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞、R D細(xì)胞
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞
Chinese Hamster Ovary細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs934T細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞
SCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞
OsA-CL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE11細(xì)胞、TE6細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞
OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞
CEM/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2106細(xì)胞、DH-82細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞
SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞
T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞
N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細(xì)胞、Th17細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞
MA-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rin-M-5F細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞、UMR106細(xì)胞
NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞
NCI-H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞
PCI-04B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 39細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞
HBZY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞
HSCT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞
U20S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP-293細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞
HEC-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞
DMS 153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞
JB 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1417細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞、FC33細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞
Clone M-3：小鼠黑色素瘤傳代細(xì)胞
PNT1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-216細(xì)胞、COV362細(xì)胞、ID8細(xì)胞
RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細(xì)胞、BT474細(xì)胞、OsACL細(xì)胞
HEK293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8.653細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞
OSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、MGC803細(xì)胞
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上海弘順生物科技有限公司長期為高校和科研單位等提供優(yōu)良的科研產(chǎn)品，在生物化學(xué)行業(yè)內(nèi)獲得良好的客戶口碑。目前，公司提供近十萬余種科研產(chǎn)品，其中涵蓋化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域。同時，我司不斷拓展產(chǎn)品種類，為用戶提供質(zhì)量更優(yōu)、價格更實惠的科研產(chǎn)品。 上海弘順生物科技有限公司 主營產(chǎn)品有： 1.生化試劑：上海弘順生物科技有限公司 在上?；瘜W(xué)工業(yè)區(qū)設(shè)有生產(chǎn)研發(fā)基地。目前，我司生化試劑產(chǎn)品已達(dá)60000多種，并呈不斷增長態(tài)勢。經(jīng)過不斷的創(chuàng)新與發(fā)展，上海弘順生物科技有限公司創(chuàng)立了公司自主試劑品牌（品牌：HonSun），為廣大科研工作者提供了高品質(zhì)的實驗試劑。我司生化試劑種類涵蓋氨基酸類、蛋白質(zhì)