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  3. Biochemical Assay Reagents
  4. Brilliant blue G-250

Brilliant blue G-250  (Synonyms: 考馬斯亮藍(lán)G-250)

目錄號: HY-D0014 純度: ≥95.0%
COA 產(chǎn)品使用指南 技術(shù)支持

Brilliant Blue G-250 是一種常用于 SDS-PAGE 分離蛋白質(zhì)可視化的染料，染色過程簡單，定量高。在 Bradford 蛋白質(zhì)分析中，由于 Brilliant Blue G-250 與蛋白質(zhì)結(jié)合，蛋白質(zhì)濃度由 595 nm 處的吸光度確定。Brilliant Blue G-250 是一種安全、高選擇性的 P2×7R 拮抗劑，有望使 NLRP3 炎癥體失活。

MCE 的所有產(chǎn)品僅用作科學(xué)研究或藥證申報，我們不為任何個人用途提供產(chǎn)品和服務(wù)

Brilliant blue G-250 Chemical Structure

Brilliant blue G-250 Chemical Structure

CAS No. : 6104-58-1

1.  客戶無需承擔(dān)相應(yīng)的運(yùn)輸費(fèi)用。

2.  同一機(jī)構(gòu)（單位）同一產(chǎn)品試用裝僅限申領(lǐng)一次，同一機(jī)構(gòu)（單位）一年內(nèi)

     可免費(fèi)申領(lǐng)三個不同產(chǎn)品的試用裝。

3.  試用裝只面向終端客戶。

規(guī)格 價格 是否有貨 數(shù)量
25 mg ￥420
In-stock
50 mg ￥620
In-stock
100 mg ￥900
In-stock
200 mg ￥1215
In-stock
500 mg ￥1950
In-stock
1 g   詢價  
5 g   詢價  

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Customer Review

  • 生物活性

  • 純度 & 產(chǎn)品資料

  • 參考文獻(xiàn)

生物活性

Brilliant Blue G-250 is a dye commonly used for the visualization of proteins separated by SDS-PAGE, offering a simple staining procedure and high quantitation. In the Bradford protein assay, protein concentrations are determined by the absorbance at 595 nm due to the binding of Brilliant Blue G-250 to proteins. Brilliant Blue G-250 is a safe highly selective P2×7R antagonist with promising consequent inactivation of NLRP3 inflammasome[1][2][3].

體外研究
(In Vitro)

使用 Brilliant Blue G-250 對聚丙烯凝膠電泳后的蛋白質(zhì)進(jìn)行染色[1]
1. 溶液的制備
考馬斯染色液：
(1) 將 100 g 硫酸鋁 (14-18 水合物) 溶解于 2000 mL Milli-Q 純水中。 加入 200 mL 乙醇 (96%)，充分混合。
(2) 加入 0.4 g Brilliant Blue G-250，攪拌均勻。
(3) 緩慢加入 47 mL 磷酸 (85%)，邊攪拌邊加入。
(4) 最后用 Milli-Q 純水將總體積調(diào)整至 2000 mL。
注意： 不要過濾該溶液，溶液應(yīng)呈現(xiàn)膠體狀態(tài)并含有懸浮顆粒。
脫色液： 取 2000 mL Milli-Q 純水，加入 200 mL 乙醇 (96%) 和 47 mL 磷酸 (85%)。
2. 染色步驟
(1) 在蛋白質(zhì)電泳分離后，將凝膠從玻璃板上小心取下。 用 Milli-Q 純水清洗凝膠 3 次，每次 10 分鐘，以去除 SDS。 使用前搖晃考馬斯染色液，使膠體顆粒均勻分散。 將凝膠浸入染色液中，在搖床上震蕩 2-12 小時。
(2) 蛋白質(zhì)斑點(diǎn)會在 10 分鐘后開始出現(xiàn)，2 小時內(nèi)可達(dá)到 80% 的染色效果。 為了獲得最佳染色效果，建議過夜染色。
(3) 染色后移除染色液，并用 Milli-Q 純水沖洗凝膠 兩次。 將凝膠放入脫色液中，震蕩 10-60 分鐘以脫去多余染料。
3. 沖洗與存儲
用 Milli-Q 純水再沖洗凝膠 兩次，使凝膠恢復(fù)原來的厚度。 凝膠可存放于冰箱中，加入酸性溶液可防止霉菌污染。
4. 注意事項
(1) 染色前請確保凝膠徹底洗凈，殘留的 SDS 會干擾染料與蛋白質(zhì)的結(jié)合。
(2) 只要染色液中仍有顆粒存在，就可以重復(fù)使用染色液。
(3) 建議將染色液存儲在深色瓶子中，以延長其使用壽命。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
分子量

854.02

Formula

C47H48N3NaO7S2
CAS 號
性狀

固體

顏色

Dark purple to black

中文名稱

考馬斯亮藍(lán)G-250
運(yùn)輸條件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
儲存方式

4°C, sealed storage, away from moisture

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)

溶解性數(shù)據(jù)
細(xì)胞實(shí)驗： 

DMSO 中的溶解度 : 12.5 mg/mL (14.64 mM; 超聲助溶 (<60°C); 吸濕的 DMSO 對產(chǎn)品的溶解度有顯著影響，請使用新開封的 DMSO)

H2O 中的溶解度 : 10 mg/mL (11.71 mM; 超聲助溶)

配制儲備液
濃度 溶劑體積 質(zhì)量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.1709 mL 5.8547 mL 11.7093 mL
5 mM 0.2342 mL 1.1709 mL 2.3419 mL
查看完整儲備液配制表

* 請根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液；一旦配成溶液，請分裝保存，避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
儲備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)。-80°C儲存時，請在6個月內(nèi)使用，-20°C儲存時，請在1個月內(nèi)使用。

* 備注：如您選擇水作為儲備液，請稀釋至工作液后，再用 0.22 μm 的濾膜過濾除菌后使用。

  • 摩爾計算器

  • 稀釋計算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

質(zhì)量
=
濃度
×
體積
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

濃度 (start)

C1

×
體積 (start)

V1

=
濃度 (final)

C2

×
體積 (final)

V2

動物實(shí)驗：

請根據(jù)您的 實(shí)驗動物和給藥方式 選擇適當(dāng)?shù)娜芙夥桨浮?

以下溶解方案都請先按照 In Vitro 方式配制澄清的儲備液，再依次添加助溶劑：
——為保證實(shí)驗結(jié)果的可靠性，澄清的儲備液可以根據(jù)儲存條件，適當(dāng)保存；體內(nèi)實(shí)驗的工作液，建議您現(xiàn)用現(xiàn)配，當(dāng)天使用；
以下溶劑前顯示的百分比是指該溶劑在您配制終溶液中的體積占比；如在配制過程中出現(xiàn)沉淀、析出現(xiàn)象，可以通過加熱和/或超聲的方式助溶

  • 方案 一

    請依序添加每種溶劑： 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

    Solubility: ≥ 0.56 mg/mL (0.66 mM); 澄清溶液

    此方案可獲得 ≥ 0.56 mg/mL（飽和度未知）的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液為例，取 100 μL 5.6 mg/mL 的澄清 DMSO 儲備液加到 400 μL PEG300 中，混合均勻；再向上述體系中加入 50 μL Tween-80，混合均勻；然后再繼續(xù)加入 450 μL 生理鹽水 定容至 1 mL。

    生理鹽水的配制：將 0.9 g 氯化鈉，溶解于 ddH?O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理鹽水溶液。
  • 方案 二

    請依序添加每種溶劑： 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

    Solubility: ≥ 0.56 mg/mL (0.66 mM); 澄清溶液

    此方案可獲得 ≥ 0.56 mg/mL（飽和度未知）的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液為例，取 100 μL 5.6 mg/mL 的澄清 DMSO 儲備液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理鹽水水溶液 中，混合均勻。

    2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-環(huán)糊精）粉末定容于 10 mL 的生理鹽水中，完全溶解至澄清透明。
動物溶解方案計算器
請輸入動物實(shí)驗的基本信息：

給藥劑量

mg/kg

動物的平均體重

g

每只動物的給藥體積

μL

動物數(shù)量

只
由于實(shí)驗過程有損耗，建議您多配一只動物的量
請輸入您的動物體內(nèi)配方組成：
%
DMSO +
% 
+
%
Tween-80 +
%
Saline
如果您的動物是免疫缺陷鼠或者體弱鼠，建議 DMSO 中的在最后工作液體系中的占比盡量不超過 2%。
方案所需 助溶劑 包括：DMSO， ，均可在 MCE 網(wǎng)站選購。 ，Tween 80，均可在 MCE 網(wǎng)站選購。
計算結(jié)果
工作液所需濃度 : mg/mL
儲備液配制方法 : mg 藥物溶于 μL  DMSO（母液濃度為 mg/mL）。

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)

您所需的儲備液濃度超過該產(chǎn)品的實(shí)測溶解度，以下方案僅供參考，如有需要，請與 MCE 中國技術(shù)支持聯(lián)系。
動物實(shí)驗體內(nèi)工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 儲備液，加入 μL 。 μL ，混合均勻至澄清，再加 μL Tween 80，混合均勻至澄清，再加 μL 生理鹽水。
連續(xù)給藥周期超過半月以上，請謹(jǐn)慎選擇該方案。
請確保第一步儲備液溶解至澄清狀態(tài)，從左到右依次添加助溶劑。您可采用超聲加熱 （超聲清洗儀，建議頻次 20-40 kHz），渦旋吹打等方式輔助溶解。
純度 & 產(chǎn)品資料

純度: ≥95.0%

參考文獻(xiàn)

Brilliant blue G-250 相關(guān)分類

完整儲備液配制表

* 請根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液；一旦配成溶液，請分裝保存，避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
儲備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)。-80°C儲存時，請在6個月內(nèi)使用，-20°C儲存時，請在1個月內(nèi)使用。

可選溶劑 濃度 溶劑體積 質(zhì)量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
H2O / DMSO 1 mM 1.1709 mL 5.8547 mL 11.7093 mL 29.2733 mL
5 mM 0.2342 mL 1.1709 mL 2.3419 mL 5.8547 mL
10 mM 0.1171 mL 0.5855 mL 1.1709 mL 2.9273 mL

* 備注：如您選擇水作為儲備液，請稀釋至工作液后，再用 0.22 μm 的濾膜過濾除菌后使用。

Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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