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  2. Others Immunology/Inflammation NF-κB Metabolic Enzyme/Protease
  3. Fluorescent Dye Reactive Oxygen Species
  4. 2′,7′-Dichlorofluorescein diacetate

2′,7′-Dichlorofluorescein diacetate  (Synonyms: DCFH2-DA)

目錄號: HY-126793 純度: 98.95%
COA 產品使用指南 技術支持

2′,7′-Dichlorofluorescein diacetate (DCFH2-DA) 是一種具有細胞滲透性的熒光探針。2′,7′-Dichlorofluorescein diacetate 可用于檢測活性氧中間體的生成，并用于評估整體氧化應激的毒理學現象。

MCE 的所有產品僅用作科學研究或藥證申報，我們不為任何個人用途提供產品和服務

2′,7′-Dichlorofluorescein diacetate Chemical Structure

2′,7′-Dichlorofluorescein diacetate Chemical Structure

CAS No. : 2044-85-1

1.  客戶無需承擔相應的運輸費用。

2.  同一機構（單位）同一產品試用裝僅限申領一次，同一機構（單位）一年內

     可免費申領三個不同產品的試用裝。

3.  試用裝只面向終端客戶。

規(guī)格 價格 是否有貨 數量
10 mM * 1 mL in DMSO ￥385
In-stock
50 mg ￥350
In-stock
100 mg ￥620
In-stock
200 mg   詢價  
500 mg   詢價  

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Customer Review

  • 生物活性

  • 純度 & 產品資料

  • 參考文獻

生物活性

2′,7′-Dichlorofluorescein diacetate (DCFH2-DA) is a cell-permeable fluorescent probe. 2′,7′-Dichlorofluorescein diacetate can be used to detect the generation of reactive oxygen intermediates and for assessing the overall oxidative stress in toxicological phenomenon[1][2].

體外研究
(In Vitro)

使用 2',7'-Dichlorofluorescein 作為熒光探針來定量細胞內的 ROS[2]
一、 實驗試劑
1. 20,70-dichlorofluorescein diacetate (DCFH2-DA)：100 nM。
2. CoCl2：20 mM，用作外部 DCF 熒光淬滅劑。
3. 細胞系：
K562：人類紅白血病細胞系 (藥物敏感)。
K562/adr：K562 的耐藥亞系。
GLC4：人類小細胞肺癌細胞系 (藥物敏感)。
GLC4/adr：GLC4 的耐藥亞系。
4. 培養(yǎng)基：RPMI 1640，添加 10% 胎牛血清 (FBS)。
二、實驗步驟
1.細胞培養(yǎng)：
(1) 將 K562、K562/adr、GLC4、GLC4/adr 細胞分別接種到 RPMI 1640 培養(yǎng)基中，添加 10% FBS，培養(yǎng)在 37°C、5% CO2 的恒溫培養(yǎng)箱中。
(2) 細胞密度應為 5×105 細胞/mL，并在 24 小時后進行下一步處理。
2. ROS測定：
(1) 處理細胞：加入 20 μM CoCl2 (外部熒光淬滅劑) 和 100 nM DCHF-DA，繼續(xù)培養(yǎng) 30 分鐘，確保 ROS 能夠充分氧化 DCHF。
(2) 測量熒光：使用 Perkin-Elmer LS-50B 熒光分光光度計，設置激發(fā)波長為 502 nm，發(fā)射波長為 523 nm，監(jiān)測 DCF 的熒光強度。
(3) 數據分析：
根據熒光強度變化擬合動力學模型，計算 DCHF-DA 去乙?；食?(ke) 和 ROS 氧化反應的速率常數 (k2[ROSi])。使用該模型，定量分析不同細胞系中 ROS 的濃度。
三、實驗結果
1. ROS 濃度：不同細胞系中 ROS 濃度不同，K562 細胞的平均 ROS 濃度為 0.67 nM，K562/adr 細胞為 0.60 nM，GLC4 為 0.66 nM，而 GLC4/adr 細胞為 0.81 nM。
2. 實驗驗證：使用 CoCl2 作為淬滅劑，可以有效去除外部 ROS 信號，確保得到的 DCF 熒光信號準確反映細胞內 ROS 的濃度。
在本實驗中，藥物耐藥細胞系 (如 K562/adr 和 GLC4/adr) 顯示出較高的 ROS 水平，提示其抗藥性機制可能與 ROS 的積累有關。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
分子量

485.27

Formula

C24H14Cl2O7
CAS 號
性狀

固體

顏色

Light yellow to orange

Emission (Em)

525
Excitation (Ex)

496
運輸條件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
儲存方式

4°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

溶解性數據
細胞實驗： 

DMSO 中的溶解度 : 33.33 mg/mL (68.68 mM; 超聲助溶; 吸濕的 DMSO 對產品的溶解度有顯著影響，請使用新開封的 DMSO)

配制儲備液
濃度 溶劑體積 質量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0607 mL 10.3035 mL 20.6071 mL
5 mM 0.4121 mL 2.0607 mL 4.1214 mL
查看完整儲備液配制表

* 請根據產品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液；一旦配成溶液，請分裝保存，避免反復凍融造成的產品失效。
儲備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C儲存時，請在6個月內使用，-20°C儲存時，請在1個月內使用。

  • 摩爾計算器

  • 稀釋計算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

質量
=
濃度
×
體積
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

濃度 (start)

C1

×
體積 (start)

V1

=
濃度 (final)

C2

×
體積 (final)

V2

動物實驗：

請根據您的 實驗動物和給藥方式 選擇適當的溶解方案。

以下溶解方案都請先按照 In Vitro 方式配制澄清的儲備液，再依次添加助溶劑：
——為保證實驗結果的可靠性，澄清的儲備液可以根據儲存條件，適當保存；體內實驗的工作液，建議您現用現配，當天使用；
以下溶劑前顯示的百分比是指該溶劑在您配制終溶液中的體積占比；如在配制過程中出現沉淀、析出現象，可以通過加熱和/或超聲的方式助溶

  • 方案 一

    請依序添加每種溶劑： 10% DMSO    90% Corn Oil

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.15 mM); 澄清溶液

    此方案可獲得 ≥ 2.5 mg/mL（飽和度未知）的澄清溶液，此方案實驗周期在半個月以上的動物實驗酌情使用。

    以 1 mL 工作液為例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 儲備液加到 900 μL玉米油中，混合均勻。

動物溶解方案計算器
請輸入動物實驗的基本信息：

給藥劑量

mg/kg

動物的平均體重

g

每只動物的給藥體積

μL

動物數量

只
由于實驗過程有損耗，建議您多配一只動物的量
請輸入您的動物體內配方組成：
%
DMSO +
% 
+
%
Tween-80 +
%
Saline
如果您的動物是免疫缺陷鼠或者體弱鼠，建議 DMSO 中的在最后工作液體系中的占比盡量不超過 2%。
方案所需 助溶劑 包括：DMSO， ，均可在 MCE 網站選購。 ，Tween 80，均可在 MCE 網站選購。
計算結果
工作液所需濃度 : mg/mL
儲備液配制方法 : mg 藥物溶于 μL  DMSO（母液濃度為 mg/mL）。

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

您所需的儲備液濃度超過該產品的實測溶解度，以下方案僅供參考，如有需要，請與 MCE 中國技術支持聯系。
動物實驗體內工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 儲備液，加入 μL 。 μL ，混合均勻至澄清，再加 μL Tween 80，混合均勻至澄清，再加 μL 生理鹽水。
連續(xù)給藥周期超過半月以上，請謹慎選擇該方案。
請確保第一步儲備液溶解至澄清狀態(tài)，從左到右依次添加助溶劑。您可采用超聲加熱 （超聲清洗儀，建議頻次 20-40 kHz），渦旋吹打等方式輔助溶解。
純度 & 產品資料

純度: 98.95%

參考文獻

完整儲備液配制表

* 請根據產品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液；一旦配成溶液，請分裝保存，避免反復凍融造成的產品失效。
儲備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C儲存時，請在6個月內使用，-20°C儲存時，請在1個月內使用。

可選溶劑 濃度 溶劑體積 質量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
DMSO 1 mM 2.0607 mL 10.3035 mL 20.6071 mL 51.5177 mL
5 mM 0.4121 mL 2.0607 mL 4.1214 mL 10.3035 mL
10 mM 0.2061 mL 1.0304 mL 2.0607 mL 5.1518 mL
15 mM 0.1374 mL 0.6869 mL 1.3738 mL 3.4345 mL
20 mM 0.1030 mL 0.5152 mL 1.0304 mL 2.5759 mL
25 mM 0.0824 mL 0.4121 mL 0.8243 mL 2.0607 mL
30 mM 0.0687 mL 0.3435 mL 0.6869 mL 1.7173 mL
40 mM 0.0515 mL 0.2576 mL 0.5152 mL 1.2879 mL
50 mM 0.0412 mL 0.2061 mL 0.4121 mL 1.0304 mL
60 mM 0.0343 mL 0.1717 mL 0.3435 mL 0.8586 mL
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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