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CHIR-98014

別名: CT98014

CHIR-98014 (CT98014)是一種有效的GSK-3α/β抑制劑，無細(xì)胞試驗(yàn)中IC50為0.65 nM/0.58 nM，作用于GSK-3比作用于其最密切的同源物Cdc2 和 ERK2選擇性高。

CHIR-98014 Chemical Structure

CHIR-98014 Chemical Structure

CAS: 252935-94-7

規(guī)格 價(jià)格 庫(kù)存 購(gòu)買數(shù)量
10mM (1mL in DMSO) 1285.83 現(xiàn)貨
5mg 958.23 現(xiàn)貨
25mg 3251.43 現(xiàn)貨
100mg 7346.43 現(xiàn)貨
1g 28419.3 現(xiàn)貨
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CHIR-98014相關(guān)產(chǎn)品

相關(guān)信號(hào)通路圖

GSK-3 Signaling Pathways

GSK-3信號(hào)通路圖

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)示例

細(xì)胞系 實(shí)驗(yàn)類型 給藥濃度 孵育時(shí)間 活性描述 文獻(xiàn)信息
BGC-823 Proliferation assay 50 nM 48 h abrogated rLMO3 protein-induced proliferation 29436606
HGC-27 Proliferation assay 50 nM 48 h abrogated rLMO3 protein-induced proliferation 29436606
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
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生物活性

產(chǎn)品描述 CHIR-98014 (CT98014)是一種有效的GSK-3α/β抑制劑，無細(xì)胞試驗(yàn)中IC50為0.65 nM/0.58 nM，作用于GSK-3比作用于其最密切的同源物Cdc2 和 ERK2選擇性高。
靶點(diǎn)
GSK-3β [1]
(Cell-free assay)		 GSK-3α [1]
(Cell-free assay)
0.58 nM 0.65 nM
體外研究(In Vitro)
體外研究活性 CHIR 98014抑制人類GSK-3β，Ki值為0.87 nM。CHIR 98014強(qiáng)有效抑制鼠GSK-3。CHIR 98014為ATP競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑,作用于抗20種其他蛋白激酶包括CDC2, erk2, tie2，KDR等的GSK-3,選擇性為500倍到1000倍以上。CHIR 98014抑制CDC2，IC50為3.7 μM。然而, CHIR 98014 作用于GSK-3高度同源的ɑ和β亞型具有相似效果,但是在GSK-3和最接近的同系物cdc2和erk2間具有明顯區(qū)別。用表達(dá)CHO-IR細(xì)胞或原代鼠肝細(xì)胞的胰島素受體處理，提高CHIR98014濃度，導(dǎo)致GS活性上升2到3倍。CHIR 98014使CHO-IR和鼠肝細(xì)胞達(dá)到半最大GS刺激反應(yīng)的濃度分別為106和107 nM。[1]
激酶實(shí)驗(yàn) 激酶實(shí)驗(yàn)
96孔板每孔加滿300 μL含激酶，肽底物，和激活劑的buffer(50 mM tris HCl,10 mM MgCl2,1 mM EGTA,1 mM二硫蘇糖醇,25 mM β-甘油磷酸,1 mM NaF,0.01% BSA,pH 7.5)。CHIR 98014加到3.5 μL DMSO中, 隨后50 μL ATP加到無細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，ATP終濃度為1 μM。溫育后, 100 μL重復(fù)三份轉(zhuǎn)移到Combiplate八孔板上，每孔含100 μL 50 μM ATP和 20 mM EDTA。1 小時(shí)后，用PBS沖洗5次, 用200 μL閃爍液密封，30分鐘后，用閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。所有實(shí)驗(yàn)步驟在室溫下進(jìn)行。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞系 CHO-IR細(xì)胞
濃度 0.01-10 μM
孵育時(shí)間 30分鐘
方法 表達(dá)人類胰島素受體的CHO-IR細(xì)胞在含有10%FBS不含次黃嘌呤的Hamm’s F12培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。胰蛋白酶化的細(xì)胞按每孔1×106個(gè)細(xì)胞接種在含2 mL無FBS的培養(yǎng)基的6孔板上。24小時(shí)后,更換培養(yǎng)基為1 mL含 GSK-3抑制劑CHIR 98014的無血清培養(yǎng)基，對(duì)照組終DMSO濃度為0.1%，在37oC下進(jìn)行30分鐘。細(xì)胞溶解在50 mM tris(pH 7.8)中,tris含1 mM EDTA,1 mM DTT,100 mM NaF,1 mM 苯甲基磺酰氟(PMSF), 及25 μg/mL亮抑酶肽(buffer A)，然后在4oC下按14000 g轉(zhuǎn)速離心15分鐘。在有6-磷酸葡萄糖存在下計(jì)算GS比活。
實(shí)驗(yàn)圖片 檢測(cè)方法 檢測(cè)指標(biāo) 實(shí)驗(yàn)圖片 PMID
Western blot p-AKT / AKT / p-GSK3β / GSK3β / β-catenin 28415692
Growth inhibition assay Cell viability 24779365
體內(nèi)研究(In Vivo)
體內(nèi)研究活性 GSK-3抑制劑CHIR-98014作用于從瘦弱的Zucker和抗胰島素的ZDF鼠分離的I型骨骼肌，激活GS活性。從ZDF鼠分離的比目魚肌明顯抗GS激活的胰島素，但是從瘦弱Zucker鼠分離的肌肉對(duì)500 nM CHIR 98014反應(yīng)程度相同，都提高40%。瘦弱Zucker鼠分離的肌肉中胰島素和CHIR 98014激活的GS比ZDF鼠分離的肌肉中強(qiáng)很多。CHIR 98014或胰島素作用于這些細(xì)胞和肌肉不會(huì)改變?nèi)縂S活性。 同時(shí), CHIR 98014不會(huì)影響從瘦弱動(dòng)物分離的肌肉中胰島素劑量反應(yīng)。 CHIR 98014作用于db/db鼠,ZDF鼠,ob/ob鼠,飲食引起的糖尿病C57BL/6鼠，及抗葡萄糖的SHHF鼠，降低高血糖，促進(jìn)葡萄糖排出。[1] 此外, CHIR98014作用于剛出生鼠的大腦皮層，降低tau蛋白Ser396位點(diǎn)的磷酸化水平。[2]
動(dòng)物實(shí)驗(yàn) Animal Models 8-9周大的db/db鼠
Dosages 30 mg/kg
Administration 皮下注射

化學(xué)信息&溶解度

分子量 486.31 分子式

C20H17Cl2N9O2
CAS號(hào) 252935-94-7 SDF Download CHIR-98014 SDF
Smiles C1=CC(=C(C=C1Cl)Cl)C2=NC(=NC=C2N3C=CN=C3)NCCNC4=NC(=C(C=C4)[N+](=O)[O-])N
儲(chǔ)存條件(自收到貨起)

體外溶解度
批次：

DMSO : 10 mg/mL ( (20.56 mM) ；DMSO吸濕會(huì)降低化合物溶解度，請(qǐng)使用新開封DMSO)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

摩爾濃度計(jì)算器

體內(nèi)溶解度
批次：

現(xiàn)配現(xiàn)用，請(qǐng)按從左到右的順序依次添加，澄清后再加入下一溶劑

 動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器

實(shí)驗(yàn)計(jì)算

摩爾濃度計(jì)算器

質(zhì)量 濃度 體積 分子量

動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器（澄清溶液）

第一步：請(qǐng)輸入基本實(shí)驗(yàn)信息（考慮到實(shí)驗(yàn)過程中的損耗，建議多配一只動(dòng)物的藥量）

mg/kg g μL 只

第二步：請(qǐng)輸入動(dòng)物體內(nèi)配方組成（配方適用于不溶于水的藥物；不同批次藥物配方比例不同，請(qǐng)聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方）

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計(jì)算結(jié)果：

工作液濃度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 藥物溶于μL DMSO溶液（母液濃度mg/mL，注：如該濃度超過該批次藥物DMSO溶解度，請(qǐng)先聯(lián)系Selleck）；

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混勻澄清后加入μL Tween 80，混勻澄清后加入μL ddH2O，混勻澄清。

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混勻澄清。

注意：1. 首先保證母液是澄清的；
2.一定要按照順序依次將溶劑加入，進(jìn)行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。

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