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Mirin

Mirin是有效的Mre11–Rad50–Nbs1(MRN)復(fù)合體抑制劑,能夠抑制Mre11相關(guān)的外切酶活性。Mirin 可抑制MRN依賴的ATM的激活。

Mirin Chemical Structure

Mirin Chemical Structure

CAS: 1198097-97-0

規(guī)格 價(jià)格 庫存 購買數(shù)量
10mM (1mL in DMSO) 1040.13 現(xiàn)貨
10mg 794.41 現(xiàn)貨
50mg 2432.33 現(xiàn)貨
200mg 5626.23 現(xiàn)貨
1g 16298.17 現(xiàn)貨
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Mirin相關(guān)產(chǎn)品

相關(guān)信號(hào)通路圖

生物活性

產(chǎn)品描述 Mirin是有效的Mre11–Rad50–Nbs1(MRN)復(fù)合體抑制劑,能夠抑制Mre11相關(guān)的外切酶活性。Mirin 可抑制MRN依賴的ATM的激活。
靶點(diǎn)
MRN [1] ATM [1]
體外研究(In Vitro)
體外研究活性

Mirin抑制了DSB誘導(dǎo)的ATM活化,ATM依賴性的下游靶點(diǎn)Nbs1和Chk2的磷酸化以及MRN依賴性的ATM在Ser1981位點(diǎn)的自磷酸化。Mirin還抑制了TOSA4細(xì)胞的G2檢查點(diǎn)以及HEK293細(xì)胞中同源依賴性的DNA修復(fù)。[1] 在整合有HPV16 (SiHa)的細(xì)胞中,Mirin增加了HPV episomes對(duì)PA25的敏感性,使PA25的IC50降低了5倍。[2] mirin的預(yù)處理還降低了cisplatin處理的293細(xì)胞的細(xì)胞活性并且抑制了增殖細(xì)胞核抗原的表達(dá)。[3]

激酶實(shí)驗(yàn) 核酶試驗(yàn)
寡聚核苷酸非發(fā)卡底物的反應(yīng)液包含25 mM MOPS (pH 7.0,60 mM KCl,0.2% Tween 20,2 mM DTT,1 mM或5 nM MnCl2 (或者5 mM MgCl2,或者5 mM CaCl2),0.1 pmol的DNA底物,以及0.3 pmol的Mre11 (或者相等數(shù)量的Mre11和Rad50混合物)終體積10 μl,37°C孵育30 min。然后加入SDS,EDTA和proteinase K使其終濃度分別達(dá)到0.2%,5 mM和0.1 mg/ml,繼續(xù)孵育15 min。取4 μl的反應(yīng)液與4 μl的甲酰胺loading buffer混合,然后放到含有10%丙烯酰胺和7 M尿素的凝膠中。電泳之后,用熒光成像系統(tǒng)分析。寡聚核苷酸發(fā)卡底物的反應(yīng)液與非發(fā)卡底物基本相同,不同的是要加入3 pmolMre11以及反應(yīng)條件是室溫孵育過夜。非同源末端反應(yīng)液包含25 mM MOPS (pH 7.0),60 mM KCl,0.2% Tween 20,2 mM DTT,4 mM MgCl2,2 mM MnCl2,0.5 mM ATP,4 ng質(zhì)粒DNA 10%聚乙烯乙二醇,0.01 pmol人源DNA連接酶I,以及0.06 pmol Mre11或者0.1單位E. coli 外切酶 III,終體積10 μl。在37°C孵育25 min后,加入Tween 20使其終濃度達(dá)到0.5%,用引物DAR5和DAR147進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR的產(chǎn)物用TA cloning kit克隆并且用自動(dòng)的ABI Capillary Genetic Analyzer進(jìn)行測(cè)序。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞系 HEK 293 cells
濃度 100 μM
孵育時(shí)間 24 h
方法

人源胚胎腎細(xì)胞HEK293用添加有5熱滅活胎牛血清,青霉素(100 U/mL),鏈霉素(100 mg/mL)的RPMI-1640培養(yǎng)基在含有5% CO2,37 °C的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。每個(gè)48小時(shí)更換新的培養(yǎng)基。細(xì)胞接種到96-孔板上,用mirin(100 μM)預(yù)處理一小時(shí),然后加入cisplatin后再孵育8小時(shí)和24小時(shí)。然后利用EZ-Cytox cell viability assay kit進(jìn)行MTT測(cè)試,MTT的降低值用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下進(jìn)行測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)圖片 檢測(cè)方法 檢測(cè)指標(biāo) 實(shí)驗(yàn)圖片 PMID
Growth inhibition assay Cell viability 18176557

化學(xué)信息&溶解度

分子量 220.25 分子式

C10H8N2O2S

CAS號(hào) 1198097-97-0 SDF Download Mirin SDF
Smiles OC1=CC=C(C=C1)\C=C2/SC(=N)NC2=O
儲(chǔ)存條件(自收到貨起)

體外溶解度
批次:

DMSO : 44 mg/mL ( (199.77 mM) ;DMSO吸濕會(huì)降低化合物溶解度,請(qǐng)使用新開封DMSO)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

摩爾濃度計(jì)算器

體內(nèi)溶解度
批次:

現(xiàn)配現(xiàn)用,請(qǐng)按從左到右的順序依次添加,澄清后再加入下一溶劑

動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器

實(shí)驗(yàn)計(jì)算

摩爾濃度計(jì)算器

質(zhì)量 濃度 體積 分子量

動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器(澄清溶液)

第一步:請(qǐng)輸入基本實(shí)驗(yàn)信息(考慮到實(shí)驗(yàn)過程中的損耗,建議多配一只動(dòng)物的藥量)

mg/kg g μL

第二步:請(qǐng)輸入動(dòng)物體內(nèi)配方組成(配方適用于不溶于水的藥物;不同批次藥物配方比例不同,請(qǐng)聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計(jì)算結(jié)果:

工作液濃度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 藥物溶于μL DMSO溶液(母液濃度mg/mL,:如該濃度超過該批次藥物DMSO溶解度,請(qǐng)先聯(lián)系Selleck);

體內(nèi)配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混勻澄清后加入μL Tween 80,混勻澄清后加入μL ddH2O,混勻澄清。

體內(nèi)配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混勻澄清。

注意:1. 首先保證母液是澄清的;
2.一定要按照順序依次將溶劑加入,進(jìn)行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。

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