P388細胞是小鼠白血病懸浮細胞，細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌，培養(yǎng)條件；RPMI-1640+10%FBS；37℃，5%CO2。

1.用75%酒精噴灑整個培養(yǎng)瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行1-3小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代，一般2天換一次液；
2.待細胞長滿瓶底面積70-80%，需要對其進行傳代，傳代比例為1:3-1：5；
3傳代步驟：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37℃預(yù)熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預(yù)熱好的胰酶，置于室溫孵育消化（第一次消化需置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為最佳消化時間，記錄最佳消化時間，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之完全脫落，然后收集細胞懸液，1000rpm離心3min，棄上清，加入完全培養(yǎng)基重懸細胞，進行傳代。