腐草霉素性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝
白色或淡黃色或白色中混雜青色的無定形粉末。從輪枝鏈霉菌的發(fā)酵液中分離獲得的一種糖肽類抗腫瘤抗生素,易溶于水、甲醇、乙醇。
腐草霉素(Phleomycin,CAS NO.:11006-33-0)是一種結(jié)構(gòu)上類似博萊霉素(bleomycin)的糖肽類抗生素,分離自輪枝鏈霉菌(Streptomyces verticillus)。作用機(jī)理在于通過結(jié)合和插入DNA進(jìn)而破壞雙螺旋的完整性,有效作用大多數(shù)細(xì)菌、絲狀真菌、酵母菌、植物和動(dòng)物細(xì)胞。
分子遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)中腐草霉素用作選擇性抗生素。對(duì)腐草霉素的抗性由印度斯坦鏈異壁菌(Streptoalloteichus hindustanus)來源的Sh ble基因賦予,該基因能夠編碼一種蛋白,與腐草霉素結(jié)合從而破壞其DNA切割活性。腐草霉素推薦用于對(duì)Zeocin敏感性比較弱的細(xì)胞,比如絲狀真菌和某些酵母菌。
本品以無菌液體形式提供,濃度為20mg/ml。用于酵母菌的推薦濃度為10 µg/ml,用于絲狀真菌的推薦濃度為25-150 µg/ml。
1、腐草霉素(0.1-50 µg/ml)能殺死大多數(shù)有氧條件下生長(zhǎng)的細(xì)胞,然而,細(xì)胞的敏感性受pH影響,比如培養(yǎng)基pH越高,敏感性越高,因而可通過提高培養(yǎng)基pH值來降低抑制完全生長(zhǎng)所需的腐草霉素濃度。另外,高滲比如原生質(zhì)體再生用的培養(yǎng)基內(nèi)腐草霉素的活性會(huì)降低2-3倍,因此,當(dāng)需要降低腐草霉素用量時(shí)可使用低鹽培養(yǎng)基。
2、成功轉(zhuǎn)染受許多因素影響,包括細(xì)胞的健康和活力,核酸質(zhì)量,轉(zhuǎn)染試劑,轉(zhuǎn)染持續(xù)時(shí)間,以及是否包含血清等。
3、使用前需要將腐草霉素置于室溫回溫,然后低速漩渦混勻。
1. 腐草霉素敏感于強(qiáng)酸,但短時(shí)間暴露于弱酸能保持穩(wěn)定;
2. 腐草霉素是由幾種結(jié)構(gòu)相似的抗生素組成的混合物,僅僅端胺有所不同。皆為銅離子螯合形式使得溶液呈藍(lán)色。主要成分為腐草霉素D1(Phleomycin D1),端胺為胍丁胺。
3. 腐草霉素有毒,請(qǐng)注意防護(hù)。
4. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Phleomycin 是在鏈霉菌中發(fā)現(xiàn)的,具有抗腫瘤活性的糖肽類抗生素 (antibiotic),可引起 DNA 斷裂。與博來霉素 (Bleomycin, HY-17565A) 類似,它與 DNA 結(jié)合并插入,破壞雙螺旋結(jié)構(gòu)的完整性。
腐草霉素
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