肌酸酶性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝
人類血清中的肌酸酐濃度,是反應(yīng)腎臟功能的重要指標(biāo)之一。人們提出了用酶法代替化學(xué)測(cè)定。由于酶促反應(yīng)專一性強(qiáng),能大大提高測(cè)定結(jié)果的可靠性,是肌酸酐測(cè)定的發(fā)展方向。酶促檢測(cè)方法的原理是,利用肌酸酐酶(Creatininase,EC 3.5.2.10)、肌酸酶(Creatinase,EC 3.5.3.3)和肌氨酸氧化酶(Sarcosine Oxidase,EC 1.5.3.1)等,對(duì)肌酸酐進(jìn)行一系列轉(zhuǎn)化,使其生成甲醛、甘氨酸、尿素與H2O2,通過(guò)測(cè)定所產(chǎn)生的H2O2的含量,可確定樣品中肌酸酐的濃度。肌酸酶能夠水解肌酸,生成肌氨酸和尿素,在酶法測(cè)定中起著極重要的作用。
中文名:肌酸酶
英文名:Creatinase
酶分類E C:3.5.3.3
酶等電點(diǎn):PI 4.80
分子量:84500
最適PH:6.50
最適溫度:35℃
Km值:46.50 mmol/L
Vmax: 8.20μmol/min
研究分離到了一株能產(chǎn)生肌酸酶的菌株,將其改造為基因工程菌,并對(duì)其發(fā)酵產(chǎn)酶條件及酶的主要特性進(jìn)行了研究。從發(fā)酵液中分離提取獲得純品。
肌酸激酶通常存在于動(dòng)物的心臟、肌肉以及腦等組織的細(xì)胞漿和線粒體中,是一個(gè)與細(xì)胞內(nèi)能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮、ATP再生有直接關(guān)系的重要激酶,它可逆地催化肌酸與ATP之間的轉(zhuǎn)磷?;磻?yīng)。
早期診斷常見的神經(jīng)科感染性疾病--急性病毒性腦炎。其嚴(yán)重的危害病人的生命和生活質(zhì)量,發(fā)病之后經(jīng)及時(shí)的治療,雖然有病人被挽救了生命,但遺留有神經(jīng)和精神功能缺損,為了使急性病毒性腦炎的病人在其發(fā)病之后能得到及時(shí)有效的治療,早期診斷至關(guān)重要,血清肌酸酶腦型同工酶存在于腦部神經(jīng)組織的細(xì)胞內(nèi),腦內(nèi)神經(jīng)組織受到破壞后釋放到血液中去,檢查血清中肌酸酶腦型同工酶的動(dòng)態(tài)變化可以反映急性病毒性腦炎腦內(nèi)神經(jīng)組織破壞及其破壞的程度,可以作為早期診斷急性病毒性腦炎的手段之一。
肌酸酶腦型同工酶(CK-BB)是肌酸激酶(CK)的腦型同工酶,它存在于中樞神經(jīng)組織中,分布相當(dāng)均勻。經(jīng)研究認(rèn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)CK-BB僅存在于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中,近年來(lái)科學(xué)家證實(shí)CK-BB也存在于神經(jīng)原胞體及其樹突、軸突中,系一種可溶性的胞漿蛋白,它極易擴(kuò)散入血、腦脊液中,它的生理功能是維持細(xì)胞內(nèi)ATP水平,并與碳水化合物代謝與離子通道細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)。當(dāng)腦組織受到損傷后細(xì)胞膜的通透性增加,細(xì)胞水腫、壞死時(shí)此酶將大量釋放入血,所以血中CK-BB的變化可以間接反應(yīng)腦組織是否受損及其受損的程度。對(duì)CK-BB連續(xù)動(dòng)態(tài)的測(cè)定,對(duì)患者的病情變化及預(yù)后有著重要意義。對(duì)血清中CK-BB的測(cè)定在急性腦血管病、急性缺氧性腦病、腦外傷等已有臨床報(bào)告,但是對(duì)急性病毒性腦炎的血清CK-BB的研究國(guó)內(nèi)未見報(bào)道。本研究顯示急性病毒性腦炎的病例與正常對(duì)照組相比CK-BB顯示明顯的增高(P< 0.05),這一結(jié)論與急性腦血管病、急性缺氧性腦病、腦外傷報(bào)道相一致,在急性病毒性腦炎的病人中檢測(cè)CK-BB可作為急性病毒性腦炎的診斷依據(jù)之一。
研究數(shù)據(jù)顯示,發(fā)病第3天CK-BB活性高于第一天和第七天,有顯著性差異,這說(shuō)明急性病毒性腦炎病人,在發(fā)病后第三天病人的血清中CK-BB最高,可作為早期診斷急性病毒性腦炎的指標(biāo)之一,但是這種增高與病情有關(guān),數(shù)據(jù)還顯示病情穩(wěn)定的病人第三天的這種增高是穩(wěn)定的,在以后的幾天中變化不明顯(P> 0.05),若病人的病情發(fā)展,腦組織損傷加重,酶的釋放就多,血清中CK-BB將隨著病情的發(fā)展而明顯的增高(P<0.05),這說(shuō)明CK-BB是觀察急性病毒性腦炎病情發(fā)展變化的指標(biāo)之一,這在臨床觀察中也得到證實(shí),50例急性病毒性腦炎中其中有8例(16%)病人雖經(jīng)積極治療血清中CK-BB持續(xù)增高最后死亡,說(shuō)明CK-BB是觀察預(yù)后的重要指標(biāo)之一。
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肌酸酶
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