9012-90-2
中文名稱
DNA 聚合酶
CAS
9012-90-2
分子式
NULL
更新日期
2024/11/27 11:59:52
基本信息
中文別名
DNA聚合酶DNA 聚合酶
KLENOW片段
REDTAQ基因組DNA聚合酶
TAQ酶/TAQ DNA聚合酶
TAQ DNA聚合酶 來源于水生棲熱菌
TAQ酶, BR,2-5U/UL,99%
英文別名
Eta2HHKF
KLENOW
MTP™
EC 2.7.7.7
IUB: 2.7.7.7
POLYMERASE I
PhyScript Taq
KLENOW ENZYME
DNA POLYMERASE
常見問題列表
簡介
DNA聚合酶是細胞復制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶，以DNA為復制模板，將DNA由 5’端點開始復制到3’端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具備模板、引物、 dNTP等的情況下)及其相輔的活性。
特性
TaqDNA聚合酶有一個特性除了合成速度快、出錯率高以外，還會使合成的產物“末端帶有一個A堿基”，TA克隆即是利用Taq聚合酶此特性，Taq的PCR產物在3'末端會多出一個A，此時只須有一個與其互補的T表現在質體上，即能彼此靠近，借由接合酶連接起來。透過此方式，可省去限制酶剪切的時間，直接利用PCR產物與質體彼此有互補兩端的特性，可快速黏合起來。
應用
TaqDNA聚合酶常用于放大短DNA片段的聚合酶鏈式反應中（PCR）。水生棲熱菌生活在溫泉與深海熱泉中，從其中分離的Taq酶可承受PCR中所需要的高溫。因此TaqDNA聚合酶取代了原先用于PCR中的大腸桿菌DNA聚合酶。
作用
DNA聚合酶Ⅰ可以沿著DNA模板，順著RNA成分的引物延長新合成的DNA鏈條。3`-5`外切酶可以校正未成功配對的脫氧核苷酸。隨著DNA的不斷復制，下游的RNA引物逐漸接近聚合活性位點，到最后，RNA引物會脫離DNA模板，形成flapDNA。在熱漲落的作用下，flapDNA會從聚合酶區(qū)脫離；同時，5`核酸酶區(qū)在熱運動的作用下偏離平衡位置，拉伸linker,逐漸移動靠近聚合酶區(qū)，最終5`核酸酶的活性位點會在聚合酶的活性位點附近將flapDNA捕獲并切除RNA引物 ，留下一個小缺口，由DNA連接酶來修補。