9007-81-2
中文名稱
弗氏完全佐劑
CAS
9007-81-2
分子式
C9H12FN3O5
更新日期
2023/12/15 11:27:26
常見問題列表
免疫佐劑
免疫佐劑是一類本身沒有抗原性，但與抗原一同注入動物體內(nèi)能通過延緩抗原排除而增強免疫效果的制劑。最常用的免疫佐劑是弗氏不完全佐劑和弗氏完全佐劑。前者是將抗原與礦物油、乳化劑(如羊毛脂)混勻形成油包水乳劑，使抗原進入動物組織后能緩慢釋出；在弗氏不完全佐劑中加入卡介苗等細菌制劑可以刺激動物的免疫系統(tǒng)，非特異性地提高免疫應答水平，稱為弗氏佐劑。弗氏完全佐劑是用礦物油(石臘油)、乳化劑(如羊毛脂)和滅活的結(jié)核桿菌制成的油色冰型乳化劑。在實驗免疫學中，可用本品促進弱抗原物質(zhì)抗體的生成。在藥理學中，可用它制造動物關(guān)節(jié)炎模型(佐劑性關(guān)節(jié)炎)。該佐劑是由美籍匈牙利細菌學家JulesThomas Freund(1891—1960)發(fā)明的，故以其名子命名。因該佐劑中含分枝桿菌，故又稱為分枝桿菌佐劑。不含分枝桿菌者為弗氏不完全佐劑。
弗氏佐劑
弗氏佐劑是一種同抗原一起或預先注入機體，能增強免疫原性，或改變免疫反應類型的物質(zhì)。佐劑的種類很多，有氫氧化鋁、甲基纖維素、百日咳菌苗等，以弗氏佐劑最為常用，弗氏佐劑分為不完全佐劑及完全佐劑兩種。完全佐劑的免疫原性強，易在注射部位形成肉芽腫和持久性潰瘍，造成較嚴重的組織損傷，因而主要用于動物實驗，不運用于人體。作用機制
免疫佐劑是指與抗原混合后注入動物體內(nèi)，能增強抗原性和機體免疫應答的一類物質(zhì)。免疫佐劑的作用：①能使弱抗原物質(zhì)增強抗原性；
②增加特異性循環(huán)抗體水平，或產(chǎn)生有效的保護性免疫；
③改變所產(chǎn)生的循環(huán)抗體類型；
④增強細胞介導的超敏反應能力；
⑤保護抗原(特別是DNA、RNA)不受體內(nèi)酶的分解。
佐劑對某些分子量小的多糖或多肽抗原性微弱的物質(zhì)，尤能增強其產(chǎn)生特異性反應的作用。
弗氏不完全佐劑與弗氏完全佐劑的區(qū)別
弗氏完全佐劑是一種油包水的乳濁液，能夠非常有效的誘導產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏完全佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細胞壁成分，可以加強對抗原的抗體反應。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放，并刺激局部免疫反應。弗氏不完全佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用，不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不完全佐劑用于加強免疫。弗氏佐劑制備方法
弗氏佐劑是現(xiàn)在動物實驗中最常用的佐劑，分為不完全弗氏佐劑和完全弗氏佐劑。不完全弗氏佐劑是液體石蠟與羊毛脂混合而成，組分比為1～5：1，可根據(jù)需要而定，通常為2：1。不完全佐劑中加卡介苗(最終濃度為2～20mg/ml)或死的結(jié)核分枝桿菌，即為完全弗氏佐劑（FCA）。一般首次注射時用1／2體積FCA加上1／2體積的抗原進行乳化，第二次或第三次注射時用不完全佐劑或不用佐劑。如不加佐劑，則抗原量增大10-20倍。配制方法：按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi)，用超聲波使之混勻，高壓滅菌，置4℃下保存?zhèn)溆谩?br /> 在免疫動物前，先將弗氏佐劑與抗原按一定比例混合，佐劑和抗原體積比一般為1：1，制備成"油包水"乳狀液。因為含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化復合物，注射入動物體內(nèi)時一定要保持乳化狀態(tài)?？乖昧恳暱乖肿恿坎煌懊庖咴约懊庖邉游锊煌幸欢ú町悾瑹o統(tǒng)一標準和固定模式。一般是每兔（約2kg重）或每羊（約20kg重）第1次注射抗原1mg，以后逐次增加抗原量，最多每次不超過3mg。
佐劑與抗原乳化可按如下方法進行：
（1）研磨法：先將佐劑加熱并取適量放入無菌的玻璃研缽內(nèi)，待冷卻后再緩緩滴入等體積的抗原溶液，邊滴邊按同一方向研磨，滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后，繼續(xù)研磨一段時間，使之成為乳白色粘稠的油包水乳劑。本法適于制備大量的佐劑抗原，缺點是研缽壁上粘附大量乳劑，抗原損失較大。
（2）注射器混合法：將等量的弗氏佐劑和抗原溶液分別吸入兩個注射器內(nèi)，兩注射器之間以一細膠管相連，注意排凈空氣，然后交替推動針管，直至形成粘稠的乳劑為止。本法優(yōu)點是容易做到無菌操作，抗原損失少，適用于制備少量的抗原乳劑。但同時難以乳化完全，個別抗原，用塑料注射器根本推不動，而用玻璃注射器又有滲漏。制備好的乳化劑經(jīng)鑒定才能適用。鑒定方法是將乳化劑滴入冷水中，若保持完整不分散，成滴狀浮于水面，即乳化完全，為合格的油包水劑。
（3）超聲：實驗室條件好點的，比如說有超聲破碎儀的，一定要控制超聲頻率和時間，超聲容易激發(fā)一些自由基，對抗原有未知損害。乳化方法要根據(jù)抗原和需要而定。
主要應用
1、弗氏佐劑可用于制備免疫原的油包水乳液。由于抗原釋放緩慢，油包水乳液中的抗原可刺激高效長期的抗體應答。2、弗氏完全佐劑中的分枝桿菌可將巨噬細胞和其他細胞吸引到注射部位，從而增強免疫應答。鑒于此原因，將弗氏完全佐劑用于初始注射，而將弗氏不完全佐劑用于隨后的加強注射。
3、Sigma公司的弗氏完全佐劑規(guī)格：產(chǎn)品編號：F5881；每毫升含1mg熱滅活的干燥結(jié)核分枝桿菌 (H37Ra, ATCC 25177)、0.85mL石蠟油和0.15mL二縮甘露醇一油酸。
有關(guān)弗氏完全佐劑的信息由Chemicalbook的彤彤編輯整理（2015-09-21）。