9004-07-3
中文名稱
糜蛋白酶
英文名稱
Chymotrypsin
CAS
9004-07-3
分子式
N/A
更新日期
2024/12/24 16:31:15
基本信息
中文別名
糜蛋白酶凝胰朊酶
胰凝乳朊酶
Α-糜蛋白酶
Α-胰凝乳酶
α-糜蛋白酶
A-糜蛋白酶
胰凝乳蛋白酶
Α-胰凝乳蛋白酶
A-胰凝乳蛋白酶
英文別名
chymarec3445
ec3446
enzeon
impral
quimar
zolyse
zolyes
D03484
avazyme
所屬類別一
生物化學品: 酶類: 治療用酶 所屬類別二
生物化學品: 生化試劑: 酶物理化學性質(zhì)
外觀性狀α-糜蛋白酶系自?；蜇i胰中提取的一種蛋白分解酶，為白色或類白色結(jié)晶粉末。無氣味，易溶于水，不溶于有機溶劑。等電點PI=8.1～ 8.6。水溶液中會迅速失活。10%的水溶液Ph值約為3,以Ph3～ 4的水溶液最穩(wěn)定。干態(tài)穩(wěn)定，在40C條件下，18個月無降低活力現(xiàn)象。
注射用糜蛋白酶為糜蛋白酶的無菌凍干品，為白色凍干塊狀物。水溶液不穩(wěn)定，宜新鮮配制。
注射用糜蛋白酶為糜蛋白酶的無菌凍干品，為白色凍干塊狀物。水溶液不穩(wěn)定，宜新鮮配制。
熔點127°C
儲存條件2-8°C
溶解度在1mMHCl中復溶。在1mMHCl中溶解度為10mg/ml。2mM氯化鈣用作穩(wěn)定劑。在-20°C下儲存分裝的溶液長達一周。
形態(tài)salt-free, lyophilized powder
顏色white
Merck13,2282
EPA化學物質(zhì)信息Chymotrypsin(9004-07-3)
安全數(shù)據(jù)
警示詞危險
危險品標志Xn,B
危險類別碼36/37/38-42/43-42
WGK Germany3
RTECS號GC3050000
F3-10
TSCAYes
海關(guān)編碼35079090
毒害物質(zhì)數(shù)據(jù)9004-07-3(Hazardous Substances Data)
制備方法
方法1
以牛胰臟為原料，經(jīng)提取、分級鹽析后先制成胰凝乳蛋白酶原，經(jīng)胰蛋白酶激活后，再用硫酸銨、乙醇重結(jié)晶精制而得。方法2
牛宰殺后1h內(nèi)取出胰臟，用硫酸在0℃浸取。浸取液用硫酸銨分級鹽析，鹽析物溶于冷蒸餾水（用硫酸調(diào)節(jié)pH），再用硫酸銨和氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH，使結(jié)晶完全，反復溶解，再結(jié)晶，得到糜蛋白酶元結(jié)晶。將糜蛋白酶元結(jié)晶活化、鹽析、透析、干燥，即得糜蛋白酶。方法3
絞碎、提取牛宰殺后，迅速取出牛胰（一般在0.5 ～1h內(nèi)），洗凈，去掉脂肪、結(jié)締組織等雜物，立即浸入預先冰凍好的硫酸溶液（0.125mol/L)中，驟然冷卻，在0C左右保存，待積滿100kg后投料。取胰投入絞肉機中絞碎成胰漿（必要時應絞3次），加入胰漿2倍量的冰冷硫酸（0.125mol/L）。置冷室中，每1 ～2h攪拌1次，浸漬提取24h。浸漬物用粗濾袋（或二層紗布）過濾，濾干后濾渣再用1倍量冷硫酸液（0.125mol/L重復上過程，再進行過濾，棄濾渣，合并2次濾液，每升濾液中加入固體硫酸銨使?jié)舛葹?42g,此時硫酸銨濃度達到40%飽和度，冷室放置，過夜，虹吸上清液，底層沉淀加入適量硅藻土作助濾劑，減壓過濾，上清液和濾液合并，得提取液。牛胰冰冷H2SO4→提取提取液
分級鹽析、結(jié)晶每升提取液中加入固體硫酸銨205g,使硫酸銨濃度達到70%飽和度，冷室放置過夜，次日上層清液棄去，底層沉淀減壓過濾至干，加入3倍于濾餅重的冰水使之溶解，重復用硫酸銨40%和70%飽和度分級沉淀，取第2次７０％飽和度沉淀濾餅，加入1.5倍于濾餅重的冰水溶解，并加入0.5倍濾餅重量的飽和硫酸銨溶液，用氫氧化鈉（5mol/L）調(diào)Ph5,于250C恒溫箱中靜置，保溫48h進行結(jié)晶（取結(jié)晶液一滴置載玻片上用100倍顯微鏡觀察，應有明顯針狀結(jié)晶），再將結(jié)晶減壓抽濾至干，得糜蛋白酶原粗制品，按牛胰質(zhì)量計算，收率5%～6%。取粗制胰蛋白酶原加入7倍量冰冷蒸餾水，使之溶解，并滴加硫酸（2.5mol/L)調(diào)節(jié)Ph達到2左右，溶液置布氏漏斗上用酸洗滑石粉過濾，濾液應澄清，再加入2倍量飽和硫酸銨溶液，滴加氫氧化鈉（5mol/L）中和酸度使Ph為5左右，在20～250C條件下，保溫靜置4h以上，即有白色沉淀析出，顯微鏡下觀察為棒狀結(jié)晶，過濾棄濾液，沉淀再按此法重復結(jié)晶3次，得糜蛋白酶原結(jié)晶。
提取液(NH4)2SO4→分級鹽析沉淀(NH4)2SO4;NaOH;Ph4^→結(jié)晶糜蛋白酶原
活化、鹽析、結(jié)晶稱取糜蛋白酶原結(jié)晶，加入3倍于該量的冰冷蒸餾水并滴加硫酸溶液，使之溶解，然后加入等量的Ph7.6磷酸鹽緩沖溶液（0.5mol/L）和一定量的氫氧化鈉[與（2）中2.5mol/L硫酸的物質(zhì)量相當]，使Ph保持在7.6，再在每100g的糜蛋白酶原中加入150倍以上的胰蛋白酶5mg。置于50C的冰箱中，使之活化48h。用硫酸（0.5mol/L）調(diào)節(jié)Ph達到4左右，在每升的活化液中加入固體硫酸銨0.5kg，鹽析并放置2h，溶液置布氏漏斗減壓過濾，棄去濾液，沉淀物用3/4倍量的硫酸（0.005mol/L），酸洗滑石粉澄清，加入少量晶種，于20～250C靜置24h，當大量的結(jié)晶生成時，過濾，即得糜蛋白酶結(jié)晶。
糜蛋白酶原冰冷；胰蛋白酶；50→活化活化
H2SO4;Ph4→鹽析；結(jié)晶糜蛋白酶結(jié)晶
透析、滅菌、干燥稱取糜蛋白酶結(jié)晶，加入3倍于該量的蒸餾水，并滴加硫酸溶液（0.005mol/L），使之溶解，每350ml裝入一個透析袋中，使透析袋浸于50的水浴中，并使內(nèi)外溶液處于同一平面上，用水連續(xù)透析2～ 3d，透析應完全。
糜蛋白酶結(jié)晶50→透析 透析液冷凍；減壓→滅菌；干燥成品
應用領域
參考質(zhì)量標準二
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原料中國藥典2000年版1080頁
指標名稱
指標
指標名稱
指標
效價/（單位/mg)
≥800/胰蛋白酶試驗/合格
Ph值（2mg/ml)
5.5～7.0/干燥失重/%
≤5.0
溶液的澄清度/澄清/熾灼殘渣/％
≤2.5
注射液中國藥典2000年版1080頁
指標名稱指標
指標名稱
指標
效價/為標示量的90.0%～ 120.0%/干燥失重/%
≤8.0
酸堿度（Ph值)
5.5 ～6.5
其他
符合注射劑有關(guān)規(guī)定
溶液澄清度和顏色
幾乎無色
參考質(zhì)量標準一
酶活力4000ATEE U/mg(單位定義：25℃，pH=7.0條件下每分鐘使237nm處吸光度減少0.001的酶量為1U)。